云南省江城县山羊地方性鼻内肿瘤病毒检测及序列分析
2022-06-07张娜西孟锦昕李钊何于雯王德琼李楠孙建美白方王静林
张娜西,孟锦昕,李钊,何于雯,王德琼,李楠,孙建美,白方,王静林
(1.江城县动物疫病预防控制中心,云南江城 665900;2.云南省畜牧兽医科学院,云南省热带亚热带动物病毒重点实验室,云南昆明 650224;3.江城县农业农村和科学技术局,云南江城 665900)
山羊地方性鼻内肿瘤(enzootic nasal tumor,ENT)是由山羊地方性鼻内肿瘤病毒(enzootic nasal tumor virus,ENTV)感染引起山羊鼻内黏膜上皮细胞异常增生的一种慢性、进行性、传染性肿瘤疾病[1],临床主要表现为食欲减退、日益消瘦、运动减少、呼吸困难,最终因呼吸衰竭而死亡,病死率最高可达100%,对山羊健康养殖危害较大[2-4]。该病在世界范围内广泛分布,除大洋洲外,其他大洲均有分布,不同地区的发病率为0.1%~15.0%[5-11]。1975 年内蒙古赤峰市首次报道了ENT 流行[12],随后湖南、四川、陕西、福建、贵州、安徽、重庆、广西和广东等地区相继报道了该病的流行,发病率为0.5~40.0%[4,13-21]。近年来,该病在我国山羊中的流行呈明显上升趋势。目前,在云南省尚未有发现ENT 病例的报道。本研究对2017年在云南省南部边境地区江城县采集的羊全血样本进行了随机PCR(random PCR)扩增以及ENTV检测,并对测序获得的基因序列进行了分析,明确云南省江城县存在ENTV 流行,这为云南省进一步开展ENT 调查以及山羊呼吸道疾病的诊断和预防提供了依据。
1 材料与方法
1.1 样本采集和保存
2017 年8 月在江城县宝藏乡一农户养殖的山羊群中,采用真空采血管,从山羊颈静脉采集血液,每只山羊采集肝素抗凝血5 mL,颠倒混匀后,4 ℃保存带回实验室,3 000 r/min 离心5 min,取出上清(血浆)分装成每管500 μL,-85 ℃冰箱保存。……
