胡 骑，张振兴，宋建领

（云南省畜牧兽医科学院，云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室，云南昆明 650224）

鼻气管鸟杆菌病是由鼻气管鸟杆菌（Ornithobacterium rhinotracheale，ORT）引起禽类的一种急性、高度接触性呼吸道传染病，鸡和火鸡易感。该病以呼吸困难、生长障碍及严重的纤维素性化脓性肺炎和气囊炎为特征。ORT 常与禽流感病毒（AIV）、大肠杆菌、传染性鼻气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒（ILTV）等病原混合或继发感染，导致感染鸡群生长缓慢，死亡率增加，给养禽业造成巨大经济损失[1-2]。该病原1981 年由德国学者发现，1994 年比利时学者建议使用“鼻气管鸟杆菌”这个术语，之后在美国、德国、英国、法国、以色列、荷兰、南非等许多国家被发现[3]。2000年陈小玲等[4]在我国首次分离到ORT。泰国、伊朗以及我国台湾地区进行流行病学和血清型调查，发现ORT 阳性率很高。目前该病分布广泛，可能呈世界性蔓延[5]。本研究对云南省易门县某养鸡场能导致相似临床症状的相关病原进行核酸检测，证实病原为ORT，经16S rDNA 基因序列分析，发现病原变异较少，这对于指导该地区鸡群细菌病防控具有参考意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病料 2020 年12 月初，云南省易门县某养鸡场出现大量流鼻涕、打喷嚏、面部肿胀、食欲下降和生长缓慢等症状的鸡只。12 月9 日，取病死肉鸡鼻腔黏液及肺、气管等组织，混合剪碎研磨，按照体积比1:10 加入PBS，反复冻融3 次后，3 000 r/min 离心10 min，取上清液提取核酸。

1.1.2 试剂 RNA/DNA 核酸提取试剂盒TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver 5.0，胶回收试剂盒TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver 4.0，PCR 试剂盒PremixTaq（TaKaRaTaqVersion 2.0 plus dye），RT-PCR 试剂盒PrimeScript Onestep RT-PCR Kit Ver.2，均为宝生物工程（大连）有限公司产品。……