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IGF-1、bFGF、ITS、2-ME2对牛耳皮肤成纤维细胞细胞周期的影响

2022-06-07孟晓俣张广辉

西北农业学报 2022年5期
关键词:血清研究

孟晓俣,刘 欣,孙 羽,张广辉,张 涌

(西北农林科技大学 动物医学院,陕西杨凌 712100)

影响体细胞核移植效率的因素有很多,其中供体细胞核不完全重编程是影响体细胞核移植效率最重要的因素。处于不同细胞周期中的供体细胞,染色质结构和表观遗传修饰不同,体细胞核移植效率也不同。通常认为,G1或G0期是最适合作为体细胞核移植供体细胞的细胞周期。目前体细胞核移植程序中供体细胞一般通过血清饥饿或接触抑制处理,让更多的供体细胞处于G1或G0期,但是这两种处理方法获得的G1或G0期的细胞只占细胞总数的70%~80%,并且获得的供体细胞容易受到损伤,因此优化供体细胞的处理方法对于完善体细胞核移植技术具有重要意义。

细胞周期分为G1、S、G2、M期。G1期还可分为G1早期和G1晚期。细胞质桥连接的两个细胞即为eG1期细胞,有研究通过震荡法获取eG1期细胞[1]。G0(静止期)细胞既不生长也不增殖。这种状态通常由有丝分裂过程中所需物质耗竭(如血清饥饿)引起,具有特定的转录[2-3]和代谢[4]变化等特征。有研究发现,对于非转基因的成纤维细胞,血清饥饿法诱导获得的G0期细胞核移植后,足月犊牛的存活率显著高于G1早期和G1晚期细胞。但是对于转基因的成纤维细胞,G1期细胞核移植后重构胚发育至足月犊牛的比例相较于G0期细胞显著升高,犊牛存活率及发育至断奶的比例也更高。用非转基因的eG1期细胞核移植后获得的重构胚发育明显优于G0和G1晚期。与G1晚期作为供体细胞时获得的重构胚相比,eG1期细胞作为供体细胞时,1级和2级囊胚发育率更高[5]。……

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