洪 俊，饶永彩

（1.武汉大学人民医院检验科，湖北 武汉 430060；2.武汉生物制品所，湖北 武汉 430060）

阵发性睡眠性血红蛋白尿（paroxysmal nocturnal hemoglobinuria，PNH）是一种罕见的获得性造血干细胞疾病，由X连锁磷脂酰肌醇聚糖A类（phosphatidylinositol glycan-class A，PIG-A）基因的体细胞突变引起；该突变导致部分或完全不能生物合成糖基磷脂酰肌醇（glycosyl phosphatidyl inositol，GPI）锚定蛋白；PNH的临床特征主要有血管内溶血、骨髓发育不良和异常部位形成血栓风险升高[1-2]。1996年以来，流式细胞术已成为检测GPI缺陷细胞的首选方法[3]。2010年，国际临床细胞计量学会发布了第1个通过流式细胞仪诊断和监测PNH的指南[4]，Sutherland等于2012年发表了后续实用指南[5]，阐述了PNH中性粒细胞和单核细胞高灵敏度检测的详细方案和分析策略，PNH中性粒细胞和单核细胞测定均采用基于荧光Aerolysin的方法——FLAER法。FLAER是Alexa-488标记的无活性气单胞菌溶素前体的变异体，可以直接结合白细胞上所有GPI连接结构的GPI部分，大量研究结果表明，FLAER法是检测PNH和相关疾病中GPI缺陷白细胞最为可靠的方法[4-6]。

腺苷二磷酸-核糖基环化酶2（CD157）是由骨髓基质细胞抗原-1基因编码的GPI锚定细胞表面酶。有研究结果表明，CD157可能具备与FLAER类似的潜在PNH克隆检测性能[11-12]。由于FLAER非常稀少，且价格昂贵，如何采用流式细胞仪快速、经济地检测PNH中性粒细胞和单核细胞PNH克隆，是当前困扰流式细胞术PNH检测更广泛开展的一个难题。目前，四色流式细胞术在我国的使用最广泛，建立可与FLAER法媲美的非FLAER四色法流式细胞术PNH克隆检测法，显然对于我国PNH克隆检测具有更现实的意义。本研……