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黔产两种桑寄生黄酮、多糖及人体必需元素含量分析

2022-05-28张双庆岳怡梅张桂玲罗绪强

贵阳学院学报(自然科学版) 2022年1期
关键词:桑寄生花椒树黄酮

张 倩,叶 迪,张双庆,岳怡梅,张桂玲,罗绪强

(1.贵州师范学院 化学与材料学院,贵州 贵阳 550018;2.贵州师范学院 地理与资源学院,贵州 贵阳 550018)

桑寄生原名桑上寄生,亦称广寄生,为檀香目桑寄生科寄生属植物[1],常寄生于桑、桃、李、油桐、油茶、马尾松、桂花、梨树、李树、油茶、厚皮香、核桃等多种植物上[2]。主要分布于我国云南、四川、甘肃、陕西、山西、河南、贵州、湖北、湖南等地[3]。始载于《神农本草经》,2015 版《中国药典》明确其性味归经及功效,能祛风湿、强筋骨,临床上常用于风湿痹痛、腰膝酸软、筋骨无力、崩漏经多、妊娠漏血、胎动不安等症状的治疗[4-5]。

桑寄生化学成分较多,药理活性较强,枝叶中富含黄酮、生物碱、萜类、多肽、蛋白、凝集素、多糖等高分子化合物、有机酸等小分子化合物,主要药物活性成分为黄酮类化合物[6-7]。桑寄生属于临床上常见的中药,贵州桑寄生资源十分丰富,全省各地区均有分布,尤以毕节、黔西南、铜仁等地的林区或住宅旁老树上寄生较多见,产量较大,且寄主具有广泛的多样性[5,8-10]。中药所谓的有效成分并不完全等于药材本身的药理作用,严格讲来,至今还没有找到中药的真正有效成分和其作用的物质基础,中药中的多糖类或黄酮化合物和金属元素可结合成金属配合物,二者协同可以发挥抗氧化功能[11-13]。本研究对黔产花椒树桑寄生与皂角树桑寄生中的黄酮、多糖及人体必需矿物质元素含量进行了测定分析,为探讨其有效成分与药物疗效关系提供参考。

1 材料

1.1 供试样品

供试黔产花椒树桑寄生和皂角树桑树桑寄生采购自贵阳市南明区万东桥中药材批发市场,产地贵州关岭。随机选择5 株成熟、健康的植株,每株按枝茎和叶片分别采集,不同株同部位样品混合成一个样装入干净信封。样品带回实验室后,用自来水和去离子水快速冲洗干净、晾干,105℃杀青,置于烘箱中60℃烘干(约4 hr),粉碎过 100目筛后封存于密封袋内避光干燥保存,备用。

1.2 主要仪器

721N 型可见分光光度计(上海仪电分析仪器有限公司);Wasst-mpx 型等离子体发射光谱仪(美国安捷伦公司);Agilent HPLC 1290-770x型高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱仪(美国安捷伦公司)。

1.3 主要试剂

无水乙醇(重庆万盛川东化工有限公司,AR);甲醇(重庆万盛川东化工有限公司,AR);无水乙酸钠(天津市登峰化学试剂厂,AR);无水氯化铝(GR);芦丁对照品(合肥博美生物科技有限公司,AR);苯酚(西陇科学股份有限公司,AR);葡萄糖(常德比克曼生物科技有限公司,AR);浓硫酸(重庆万盛川东化工有限公司,AR);硝酸(上海国药集团化学试剂有限公司,GR);氢氟酸(重庆川东化工有限公司,GR)。

2 方法

2.1 黄酮含量的测定

以85%乙醇为提取液,料液比为1:30,85℃下提取3 小时,反复提取2 次,合并滤液,减压浓缩至一定体积。黄酮含量采用三氯化铝醋酸钠显色法测定[14],标准曲线方程为y=20.924x+0.0167,r=0.9994。

2.2 总多糖含量的测定

以水为提取液,料液比1:20,95℃下提取2 小时,反复提取2 次,合并滤液,减压浓缩至一定体积。多糖含量采用苯酚-硫酸法测定[15-16],标准曲线方程为y=63.033x+0.0512,r=0.9997。

2.3 元素含量的测定

称取0.25 g 样品于聚四氟乙烯坩埚中,加入2 mL超纯浓硝酸和1.5 mL 氢氟酸(沿壁加入以冲刷瓶壁避免粘留样品),盖上盖子及不锈钢外套,拧紧,放入烘箱中于150℃加热16 h。取出冷却,置于电热板上蒸干,加入硝酸,蒸干,反复两次以确保HF 除尽。然后再加入2 mL 硝酸,盖上盖子,于150℃加热16 h。最后将消解液完全转移至25 mL 容量瓶中定容,控制瓶中酸度为2%左右,待测。做样品的同时,用上述步骤制备空白样2-3 个(空白样指不加样品,只加HNO3和蒸馏水,但要保证容量瓶中HNO3浓度在2%左右)。

K、Ca、Mg含量采用等离子体发射光谱仪测定,测定波长选择依次为K:767 nm;Ca:423.5 nm;Mg:286.0 nm。Fe、Mn、V、Co、Cr、Cu、Zn、Mo、Ni 含量采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱仪测定。以植物成分分析标准物质GBW07604(GSV-3)杨树叶作质量控制,标样元素含量测定结果均在标准值范围内。各项测定值均为植物干物质的元素总量。

3 结果与分析

3.1 黄酮含量

黄酮类化合物属植物次生代谢产物,是广泛存在于自然界中的具有2-苯基色原酮结构的化合物,是人类饮食中最丰富的多酚类物质,约占摄入总量的2/3。黄酮类化合物主要以苷类或碳糖基的形式存在于植物体内,也有以游离形式存在的。因其具有多种显著的生理活性从而具有重要的药用价值,黄酮类化合物不仅可以防治心血管疾病,还有止咳、祛痰、抗菌、抗自由基、抗氧化的作用。可提高机体免疫能力,有一定的抗癌能力[17-18]。陈志杰对红花桑寄生叶片的黄酮含量和其抗氧化活性进行了研究,结果表明红花桑寄生叶片黄酮含量为4.65%,具有一定的抗氧化活性[19]。陈晓琪等研究表明桑寄生总黄酮对链脲佐菌素致高血糖有很好的降糖效果[20]。桑寄生总黄酮对佐剂性关节炎大鼠有明显的祛风湿作用[21]。

研究结果表明(图1),不同寄主桑寄生黄酮含量不同,且在叶片和枝茎间差异显著。供试样品中,黄酮含量以花椒树桑寄生叶片中最高,为71.22 mg/g,皂角树桑寄生枝茎中最低,为13.89 mg/g。黔产两种桑寄生叶片中黄酮含量均高于枝茎中含量,花椒树桑寄生叶片黄酮含量是枝茎的3.2 倍,皂角树桑寄生叶片黄酮含量是枝茎的4.2 倍。

图1 两种寄主桑寄生叶片与枝茎黄酮含量

3.2 多糖含量

多糖又称多聚糖,由糖苷键连接起来的醛糖或酮糖组成的高聚物,是营养素的重要组成部分,在自然界中广泛存在,包括植物、动物以及微生物,其中植物多糖因具有低毒性、高生物相容性、高生物降解性及抗肿瘤、抗氧化损伤、抗癌、抗菌、和增强机体免疫等多种生物活性成为目前的研究热点[22-27]。对桑寄生多糖的研究主要集中在红花桑寄生和椆树桑寄生[28-29],对花椒桑寄生和皂角树桑寄生多糖的含量研究鲜见文献报道。

本研究结果表明(图2),不同寄主桑寄生多糖含量不同,且在叶片和枝茎间差异显著。供试样品中,多糖含量以皂角树桑寄生枝茎中最高,为0.87mg/g,花椒树桑寄生枝茎中最低,为0.26 mg/g。黔产两种桑寄生多糖在叶片和枝茎中多糖含量不像黄酮含量叶片均高于枝茎,花椒树桑寄生叶片多糖含量是枝茎的1.9 倍,而皂角树桑寄生枝茎黄酮含量是叶片的1.3 倍。

图2 两种寄主桑寄生叶片与枝茎多糖含量

3.3 必需元素含量

一般认为有机化学成分是决定中药性能与药效的主要因素,近年来发现微量元素是沟通动物与植物信息的桥梁,微量元素与活性物质在人体内相互协同、相互补充、相互渗透、相互制约,并参与体内各类生化反应,促进机体自身调节,从而达到治疗疾病的目的。

K、Ca、Mg、Fe、Mn、V、Co、Cr、Cu、Zn、Mo、Ni 既是植物必需元素,也是人体必需元素。本研究结果表明(表1),不同寄主桑寄生K、Ca、Mg、Fe、Mn、V、Co、Cr、Cu、Zn、Mo、Ni 等12种必需元素的含量和分配模式均有所不同。K、Ca、Mg、Fe、Mn、V、Co、Cr 元素含量在花椒树桑寄生和皂角树桑寄生叶片中的含量高于枝茎中的含量,Zn、Mo、Ni 元素含量在花椒树桑寄生和皂角树桑寄生枝茎中的含量高于叶片中的含量,而Cu 元素含量在两种桑寄生叶片与枝茎中的含量相差不大。

表1 不同寄主桑寄生叶、枝必需元素含量(mg·kg-1)

4 结论

黄酮含量以花椒树桑寄生叶片最高,皂角树桑寄生枝茎最低,黔产桑寄生中叶片的黄酮含量远远高于枝茎中的含量。皂角树桑寄生多糖含量高于花椒树桑寄生多糖含量,多糖含量在桑寄生中的高低顺序为皂角树桑寄生枝茎>皂角树桑寄生叶片>花椒树桑寄生叶片>花椒树桑寄生枝茎。K、Ca、Mg 元素在叶片中的含量均是皂角树桑寄生高于花椒树桑寄生,而在枝茎中的含量均是花椒树桑寄生高于皂角树桑寄生。Fe、Cr、Zn、Mo、Ni 含量,无论是在叶片中还是在枝茎中均是皂角树桑寄生高于花椒树桑寄生,而Mn 则相反。V、Co 含量在两种寄生中均是叶片的含量均高于枝茎的含量,但花椒树桑寄生中叶片和枝茎间的差距比较大,而皂角树桑寄生中叶片和枝茎间的含量比较接近。Cu 含量在两种寄生间的差别不大,在同种寄生中叶片和枝茎间的差别也不大。桑寄生黄酮、多糖、人体必需元素含量间可能存在某种关系,这种关系的改变对桑寄生药效可能会产生一定程度的影响,关于这方面的探讨,有待进一步研究。

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