敖 静，李 杨，刘晓辉，高晓梅，孙玉禄

(辽宁省微生物科学研究院，辽宁 朝阳 122000)

黄瓜枯萎病是主要由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)侵染引起的土传真菌病害，可侵染多种植物寄主，病菌通过分泌降解酶和菌毒素等侵染作物的维管束系统，导致作物出现萎蔫和腐烂等症状[1-2]，可引起作物和花卉枯萎病，严重时造成植株死亡，从而使作物大量减产，影响农业发展[3-5]。尖孢镰刀菌的菌丝和孢子可存留在土壤或作物种子上越冬，在土壤和空气中能存活10 年以上[6]。目前，农业生产中主要通过化学药剂防治尖孢镰刀菌，如利用唑类、甲酯类和酰胺类等药物对种子进行消毒，或对作物植株进行灌根等处理以抑制病原菌生长[7-8]，但长期大量施用化学药品不仅会污染作物、土壤和水系，产生病原菌耐药性的风险，还会直接影响人类健康[9-10]。目前，生物防治是应用前景广、成本较低且绿色无污染的技术[11]。本研究以尖孢镰刀菌黄瓜转化型为研究对象，通过从设施温室土壤中筛选出高效拮抗菌株并研究其抑菌作用，旨在为进一步探究拮抗菌的生防作用机制提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

病原菌：尖孢镰刀菌(F.oxysporum)黄瓜转化型，由辽宁省微生物科学研究院分离。

1.2 拮抗菌的筛选和鉴定

1.2.1 拮抗菌筛选

于辽宁省朝阳市喀左县六官营子乡东前沟村(N41.16°，E119.68°)种植黄瓜的设施温室中采集土壤样品，将其混匀后称取1.0 g 放至99 mL无菌水中，振荡约30 min。梯度稀释至10-5倍，吸取100 μL 均匀涂布于含病原菌的平皿中，28 ℃培养24 h，将能产生抑菌圈的菌株分离纯化，即得到初筛菌株。……