臧旖欣，于婷婷

(佳木斯大学, 黑龙江 佳木斯 154007)

目前，临床上，义齿性口炎是常见的口腔疾病之一，好发于口腔卫生状况不佳，常年戴用义齿的中老年人。口腔内细菌感染是非常常见的，口腔中基托的存在会使口腔清洁困难，利于细菌的生长，白色念珠菌[1]是口腔内常见菌种之一可引起义齿性口炎，常见的抗真菌药物可以产生抗菌效果，但由于耐药菌株的出现及抗菌药物之间可能存在的相互拮抗作用，所以有必要开发新的抗菌药。氯化镧是一种相对少见的稀土化合物，具备消炎镇痛、抗菌、抑制癌症等优点[2]。稀土元素在口腔医疗的使用研究，主要集中在它的防龋作用上，有研究表示镧可干扰菌斑的产酸过程，对变形链球菌也有直接抑菌作用。也有研究证实，氯化镧作为稀土化合物能有效防止瘢痕组织的形成[3]，但是至今尚未见镧盐的添加对义齿基托抗菌作用的相关报道。笔者希望通过本实验为氯化镧增加基托抗菌性提供实验依据，为氯化镧应用于义齿性口炎的预防做一些初步讨论。

1 材料和方法

1.1 菌株

国际标准菌株白色念珠菌ATCC10231。

1.2 实验试剂及仪器

氯化镧粉末、热凝固化义齿基托材料和单体、生理盐水、沙堡液体培养基、恒温培养箱、全自动菌落回收仪、高压蒸汽灭菌锅、4℃冰箱、-80℃冰箱。

1.3 氯化镧抗菌性检测

1.3.1 制备菌液浓度：取培养基中液体对白色念珠菌做10-1稀释，得到1×105CFU/mL浓度的菌液4℃保存备用。

1.3.2 制备抗菌剂溶液浓度：将氯化镧粉末制成40mg/mL、30mg/mL、20mg/mL、10 mg/mL、5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL、0.625mg/mL，并标1～8号备用。

1.3.3 液体稀释法：1×105CFU/mL的白色念珠菌菌液1mL分别加入上述1～8号试管内，此时氯化镧溶液浓度为：20mg/mL、15mg/mL、10mg/mL、5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL、0.625mg/mL、0.313mg/mL。

1.3.4 实验分组：阳性对照组：1mL白色念珠菌菌液和1mL生理盐水；阴性对照组：0.313mg/mL的抗菌剂溶液2mL；实验组：1～8号试管内的液体混匀后37℃培养24h。

1.3.5 细菌培养：从上述各试管内取0.2mL液体置于培养基中，37℃需氧培养24h。

1.4 氯化镧基托抗菌性检测

1.4.1 实验样品制备：按质量比制作抗菌浓度为：0.3%、0.5%、0.7%、1.5%、2.0%、2.5%的基托，制成40mm×40mm×2mm的基托试件，以普通基托为空白对照组，每组6个。以1000目水砂纸打磨、抛光，消毒，干燥备用。

1.4.2 实验：复苏、活化菌株、接种、培养24h后菌落计数。每组实验重复3次。

1.5 抗菌率计算

R% =(空白对照样品平均回收菌落数-抗菌实验材料平均回收菌落数)/空白对照组平均回收菌落数抗菌率 ×100%，R%≥99%的抗菌树脂可以报告有强抗菌作用，R%≥90%可以报告有抗菌作用。

1.6 统计学方法

2 结果

氯化镧对白色念珠菌的MIC为2.5mg/mL，MBC为5.00mg/mL。当抗菌剂浓度<2.0%时，材料抗菌率低于90%,抗菌剂浓度为2.0%时，抗菌树脂基托对变异链球菌抗菌率为 90%，表示有抗菌作用；浓度为2.5%的抗菌树脂基托对白色念珠菌的抗菌率达99%，表示当材料浓度为2.5%时，有强抗菌作用。

表1 氯化镧抗菌基托对白色念珠杆菌的抑菌结果(菌落数单位： 抗菌率：R%)

3 讨论

在基托中添加一定数量有抗菌作用的材料，可以抑制口腔中义齿性口炎的产生，葛亚丽等将纳米Ag-TiO2加入基托材料中，有效的抑制了口腔中常见菌的生长[4]。曹香林等将纳米氧化锌添加到热凝基托树脂中有效的提高了基托的抗菌性[5]。将氯化镧的镇痛消炎、抑菌作用附加入基托中，对于义齿基托来说是口腔材料应用中比较理想的结果。氯化镧作为稀土化合物在临床上的应用越来越广泛，江川等将氯化镧加入人工关节磨损颗粒中，证实了氯化镧可以有效抑制磨损颗粒抑制炎症反应[6]。周梦妮等的研究证明，氯化镧对人卵巢肿瘤细胞有比较明显的抑制作用[7]。孙嘉方等将镧盐作为口腔冲洗液对大鼠牙周组织进行冲洗，证实镧盐对炎症有明显的抑制作用[8]。本实验中将氯化镧作为添加剂添加入义齿基托中，是利用了氯化镧的有效抗菌作用。添加氯化镧的树脂基托能有效抑制其表面的白色念珠菌生长，当添加量达2.0%时，添加氯化镧的树脂基托表明有抗白色念珠菌作用，随氯化镧添加量的增加，树脂基托抗菌率(R%)也随之增高。氯化镧可有效抑制白色念珠菌菌膜形成，并且结合Ca2+生成抗酸性较好的磷酸镧保护层。这与陈晖，研究结果一致[9]。菌斑生物膜的形成是由多种因素共同作用的结果，细菌浓度、基托材料、口内食物酸甜度、食物存留时间、口腔清洁度、清洁频率等都有一定影响[10]。白色念珠菌是公认的口腔义齿性口炎致病菌，若基托磨光度差、口腔清洁度不足、清洁频率低、唾液黏稠度高，白色念珠菌的附着会明显增加，随着氯化镧的添加，白色念珠菌附着相对减小，能够有效控制口腔中念珠菌数量的增加。抗菌基托可以抑制病原菌的生成与生长，抑制白色念珠菌菌膜的形成[11]。本研究说明氯化镧的添加能有效抑制白色念珠菌的生长赋予基托抗菌性，且氯化镧为白色粉末状物质，因此，其在义齿基托的添加可行性高，并且不会影响义齿基托原有的颜色，美观性较好，但是本实验为体外试验，体内抑菌实验尚未进行，抑菌机制、体内抑菌结果等有待进一步研究。