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实时荧光定量PCR技术在本科实验教学中的应用探讨

2022-05-21张贺翠李帮秀薛雨飞朱利泉

南方农业 2022年7期
关键词:本科生实验教学实验

张贺翠,冯 萍,李帮秀,薛雨飞,杨 昆,朱利泉

(西南大学农学与生物科技学院,重庆 400715)

分子生物学是生物学的前沿与生长点,是指从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学,它同时是一门理论与实践相结合的综合性的新兴学科[1]。分子生物学主要的研究领域是蛋白质体系、蛋白质-核酸体系(中心是分子遗传学)和蛋白质-脂质体系(即生物膜),它目前是农林院校生物专业和涉农专业的重要课程,分子生物学实验技术已成为生命科学领域普遍运用的方法和手段,实验课是一门让学生理解、掌握分子生物学技术的课程[2]。

聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种根据生物体内DNA 半保留式复制的特点而设计的在体外对特定的DNA 序列放大扩增的新技术。PCR 反应最大的特点是将微量的DNA 进行快速大幅度的扩增,例如化石中的古生物,或者脱落许久的毛发甚至皮肤中只要有一点点DNA都可以通过PCR技术加以扩增和放大,因此目前在分子生物学及其相关学科中得到广泛的应用[3]。

实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)技术是在普通的聚合酶链式反应基础上发展起来的一种高度灵敏的核算检测技术[4]。qRT-PCR的基本原理是在PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR 进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法[5]。由于qRT-PCR技术较常规PCR 技术相比,具有污染少、定量准确、实时监测、自动化程度高等优点,qRT-PCR 技术在目前的科学研究中大量使用,经常在转基因检测、作物育种、环境科学及医学等领域中使用[6]。……

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