周海军，杨 耀，后双喜，杨 非

(碌曲县动物疫病预防控制中心，甘肃 碌曲 747200)

藏羊养殖产业与广大藏区农牧民群众生产生活息息相关，藏羊养殖产业的发展对藏区的社会进步，经济发展起着举足轻重的作用，特别是在脱贫攻坚期，产业发展、产业脱贫、增加农牧民收入起到不可替代的作用。提高藏羊养殖效率，防制藏羊各类疫病的发生是养羊业的重要环节。免疫接种是预防藏羊疫病的主要措施之一；但藏区藏羊养殖大多数以粗放放养模式为主，养殖区域分散、饲养设施简陋、劳动力有限、加之藏羊性情狂野等因素给疫苗接种带来了诸多不便，且疫苗种类多，注射周期长。如：甘南藏族自治州碌曲县藏羊共注射口蹄疫、小反刍兽疫、包虫病(间隔28天二免)、羊梭菌病、羊痘等5种疫苗共6次免疫注射，每次注射间隔15 d，全部注射完需三个月。为提高免疫效率，缩短疫苗注射周期，笔者与碌曲县动物疫控中心于2020年4月2日探索开展了同时注射口蹄疫和小反刍兽疫疫苗试验研究工作。

1 试验材料

1.1 试验动物

选择碌曲县西仓镇跟萨村村民周瓜家羊群，此羊群以放牧为主的健康藏羊群。

1.2 疫苗

注射疫苗为中农威特畜牧生物技术股份有限公司生产的口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗(O/HB/HK/99株+AF/72株)生产批号为D191110J；新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产的小反刍兽疫(Clone9株)生产批号为2018008-1。

1.3 接种疫苗准备

免疫接种前，查看使用疫苗包装、确定包装完好、无破损；查看疫苗的生产时间、生产批号、有效期、确定疫苗在有效期内；查看疫苗性状，确定疫苗无分层、腐败、浑浊等异常情况。

使用疫苗提前取出在室温条件下放置2 h或者在35℃温水中放15 min进行回温处理，并轻轻摇动，充分混匀。

1.4 试验免疫羊只观察

正式免疫注射前要检查试验羊群健康状况，主要向养殖户了解羊只的饮食、饮水、免疫等情况；向养殖户了解周边畜禽发病或死亡情况；检查羊只精神、食欲、行为、体温等临床特征，确定健康状况；查看羊只免疫证明和标识，核实存栏羊只免疫状况。

2 试验方法

2.1 实验羊只分组

从羊群中选择体质良好的羊只并随机进行分组，每组羊只不分年龄、公母，实验组50只，对照1组50只，对照2组50只，三组羊只分别用黑、红、蓝三种打号笔进行区分并混群放牧。

2.2 疫苗注射方法

试验组羊只一次分点注射小反刍兽疫疫苗，口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗；对照一组注射小反刍兽疫疫苗；对照二组注射口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗。具体注射时间及剂量见表1。

表1 疫苗注射时间及剂量一览表

3 免疫效果评价

3.1 临床观察

注射疫苗后，对试验羊进行3 d的临床观察，发现3组实验羊体况和精神状态均未出现不良反应。

3.2 实验室抗体检测结果

3.2.1 采样 注射后第28天对3组实验羊分别随机采样20份血清，送碌曲县动物疫病预防控制中心进行实验室抗体检测分析。

3.2.2 检测方法及依据 口蹄疫抗体检测使用液相阻断-酶联吸附实验(LpB-ELISA)GB/T18935-2018；小反刍兽疫抗体检测使用小反刍兽疫抗体阻断ELISA实验GB/T27982-2011。

3.2.3 结果判定 试验结果如表2 和图1、图2所示，阳性对照阻断率为(PB)>60，阴性对照阻断率为(PB)<40，试验结果有效。待检样品阻断率(PB)>50，判为阳性，待检样品阻断率(PB)≤50，判为阴性。

表2 实验室结果对照表

图1 试验组与对照Ⅰ组结果分析

图2 试验组与对照Ⅱ组结果分析

4 结论

试验表明藏羊同时分点注射口蹄疫与小反刍兽疫两种疫苗，免疫羊只没有临床表现，试验室检测结果表明一次分点注射口蹄疫和小反刍兽疫两种疫苗产生两种抗体互不影响，与单独注射其中一种疫苗所产生的抗体差异不明显，符合国家规定抗体保护率。藏羊同时注射口蹄疫、小反刍兽疫两种疫苗不影响抗体效价，具有一定的可操作性。