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樱桃砧木吉塞拉6 号快繁体系建立

2022-05-13刘智强

园艺与种苗 2022年3期
关键词:塞拉外植体壮苗

王 淼,赵 慧,王 媚,安 冬,刘智强

(大连市现代农业生产发展服务中心,辽宁大连 116036)

吉塞拉系列(Gisela)樱桃砧木源于德国Justus Liebig大学果树研究所,是将灰毛叶樱桃(Prunus canescens L.)和酸樱桃(Prunus cerasus L.)进行种间杂交培育而成的三倍体杂种[1]。吉塞拉系列樱桃砧木是目前国内外普遍认为的最优良的樱桃砧木,吉塞拉6 号(简称G6)具有矮化性、早果性、早丰产、耐涝、抗病、土壤适应能力强等优点,与大多数甜樱桃嫁接亲和[2],作为早熟品种的矮化樱桃砧木,扩大种植规模可优化种植产业结构、提高市场供应,具有极高的经济效益和社会效益[3]。嫁接繁殖的方式可以显著提高樱桃的经济效益,因此选择并培育优良的樱桃砧木具有非常重要的意义。常规条件下,吉塞拉系列大樱桃矮化砧木存在繁殖困难的问题,采用分株繁殖速度较慢,扦插成活率低。研究该砧木丛生芽的诱导、继代、生根以及炼苗与移栽方面的组培快繁技术,旨在为大规模、快速生产该砧木组培苗提供理论和实践依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验材料。樱桃砧木吉塞拉6 号(G6)一年生枝条。

1.1.2 试验试剂。培养基各药品均为市售分析纯和生化试剂。

1.2 方法

1.2.1 樱桃外植体脱毒及增殖培养基筛选。取G6 一年生枝条,用清水冲洗干净,剪成1~2 cm 的茎段,在75%的酒精中浸泡30 s,用0.1 HgCl2消毒10 min,无菌水冲洗3次,接种于增殖培养基上。每处理6 瓶,每瓶接种4 个茎尖。培养基以MS 为基本培养基,附加不同浓度和不同种类的植物生长调节物质,诱导约60 d 后,统计分化率、增殖倍数。

1.2.2 壮苗培养基筛选。当不定芽长满瓶时,将吉塞拉6号大樱桃砧木的芽从培养瓶中取出,去除老化组织,进行切割,接于壮苗培养基中。以MS 培养基为基本培养基,试验不同浓度的6-BA、NAA、IBA 对材料平均高度的影响,每个处理6 瓶。

1.2.3 生根培养基筛选。选取苗高在1.5 cm 以上的健壮嫩苗,分别加入NAA 0.8 g/L、IBA 0.3 g/L+NAA 0.3 g/L、IAA 0.3 g/L+6BA 0.5 g/L+IBA 0.5 g/L +活性炭0.5 g/L 3种生根培养基中培养。暗培养5 d 后,再置于正常的光照条件下进行培养。每处理30 株,40 d 后调查生根率和单株根数。

1.2.4 项目测定及方法。

分化率(%)=(已分化的外植体数/接种外植体总数)×100。

增殖系数=瓶苗在一个周期内形成的有效苗数/接种苗数

1.2.5 数据处理。采用SPSS 软件对数据进行分析。

2 结果与分析

2.1 樱桃外植体脱毒及增殖培养基筛选

G6 外植体在6 号培养基上增殖能力最强,繁殖系数达3.4,且试管苗生长旺盛,叶片翠绿,玻璃化现象较少,试管苗茎尖褐化、枯死明显得到抑制(图1);4 号、5 号培养基上增殖能力较强,增殖系数分别达2.9、3.0,生长情况较好;1 号和2 号培养基上增殖能力较差,且随着培养时间延长,易出现玻璃化现象,叶片呈水浸透明状。综上,分化效果最好的培养基为MS+6BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L,分化率及增殖倍数可达92%和3.4。

图1 G6 在不同分化培养基上的生长情况(从左至右分别为配方1~6)

2.2 壮苗培养基筛选

G6 组培苗在3 号和4 号培养基的壮苗效果最好,平均高度可达3.9 cm 和4.1 cm,但是在4 号培养基中,组培苗出现叶片变黄,茎尖枯死的现象,而在3 号培养基中,叶片翠绿,生长旺盛(图2)。综上,适合G6 组培苗壮苗的培养基为MS+6BA1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L+NAA 0.05 mg/L。

表1 吉塞拉6 号在不同增殖培养基中的生长结果

表2 吉塞拉6 号在不同壮苗培养基中的生长结果

图2 G6 在不同壮苗培养基上的生长情况(从左至右分别为配方1~4 的生长情况)

2.3 生根培养基筛选

从表3 可以看出,1 号培养基苗的基部有愈伤组织出现,根系较粗而脆;2 号培养基生根率较高,但根数少,有时仅生长出一条细长的白色根,且易产生须根,根系较细而柔软;3 号培养基生根较好,一般8 d 左右就能看见较粗的小根长出,单株根数也较多,因此,最适合吉塞拉6 号生根的培养基为1/2MS+IAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+活性炭0.5 g/L。

表3 吉塞拉6 号在3 种培养基中的生根情况

图3 G6 在不同培养基中的生根情况(从左至右分别为配方1~3 的生根情况)

3 结论与讨论

3.1 激素对吉塞拉6 号分化的影响

分化培养基中,只加入6-BA 时,分化率低,分化苗生长状态不好,易出现玻璃化等现象;在分化培养基中加入适量的NAA,能显著提高樱桃砧木的分化率,也就是说6BA、IBA 和NAA 的共同作用下,分化率高于6BA 和IBA 组合。

3.2 激素对吉塞拉6 号生根的影响

生根培养中发现外源激素的添加量及种类是影响生根的关键,试验中,添加过高的NAA 会在茎的底部产生过多的愈伤组织,生出的根系粗且脆,生根率低。添加IAA,IBA 和活性炭的效果较好,生根率高,生根数多,根系粗壮,侧根多,基部愈伤组织少。

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