(青岛大学基础医学院，山东省神经相关疾病的机制与重点防治实验室，山东省沿海地区神经退变疾病协同创新中心，山东 青岛 266071)

帕金森病(Parkinson’s disease，PD)是一类常见的神经系统退行性疾病，PD主要的病理改变是中脑黑质致密部多巴胺(DA)能神经元的变性死亡，进而引起纹状体DA含量显著降低[1]。虽然导致这一病理改变的确切病因目前仍不清楚，但脑内黑质铁异常聚集被认为是一种重要的致病因素[2]。1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(MPTP)是一种常用的PD小鼠造模的神经毒素，可以选择性地损伤黑质中的DA能神经元并且诱发PD。MPTP在星形胶质细胞中可被代谢为1-甲基-4-苯基吡啶阳离子(MPP+)，之后再通过DA转运体进入DA能神经元并导致其氧化应激水平升高[3]。目前研究发现，MPTP诱导的PD小鼠模型的黑质中，铁水平升高且DA能神经元丢失[4]。MPP+能够引起细胞内铁的聚集，增强转铁蛋白受体1(TFR1)和二价金属转运蛋白1(DMT1)的表达[5-6]。

铁调节蛋白2(IRP2)在维持细胞铁稳态中发挥着重要作用[7-10]。本课题组前期研究显示，MPP+诱导的PD细胞模型内IRP2表达水平下降[11]，这提示IRP2蛋白在MPP+诱导的PD模型中可能发挥潜在作用。但高表达IRP2如何影响MPP+的细胞毒性仍不清楚，本实验旨在探讨IRP2高表达在MPP+诱导PC12细胞损伤中的作用。

1 材料和方法

1.1 实验材料

PC12细胞购于中国科学院上海生命科学研究所；MPP+、CCK-8试剂盒购买于美国Sigma公司；胰酶购于美国Biosharp公司；多功能酶标仪购于芬兰Perkinelmer公司；LipotamineTM2000购于美国Invitrogen公司；IRP2抗体购自美国Abcam公司；β-Actin抗体购于美国CST公司；Myc-vector空载质粒和携带IRP2基因的Myc-IRP2质粒来自实验室前期构建。……