张爱琼 ，黎娜铭 ，黄 书 ，张宇鑫 ，吴 艳 ，吴学祥

（1.毕节市动物疫病预防控制中心，贵州 毕节 551700；2.贵州大学动物科学学院，贵州 贵阳 550025；3.贵州省独山县麻尾镇人民政府，贵州 独山 558206）

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，S.aureus）是一种无芽胞、无鞭毛的革兰氏阳性菌，显微镜下似葡萄串状，直径0.5~1.5 μm，适宜在普通培养基和血琼脂培养基上生长，在麦康凯平板培养基上几乎不能繁殖。该菌广泛存在于大气环境、饲料、食物、水源、场地以及物体表面，对人和畜禽具有一定的致病性，可引发受伤感染、化脓病症、肠内炎症、败血症及毒素作用，可存在于畜禽的表皮、黏膜、大肠、鼻腔及气管，甚至是乳腺中。近年来，金黄色葡萄球菌耐甲氧西林分离株的逐渐增加，耐药性发生变异，临床用药变得复杂化，给临床猪只疫病防治带来了很大的困难，造成了较大的经济损失。对金黄色葡萄球菌进行分离鉴定以及耐药性分析具有非常重要的意义，本试验旨在为金黄色葡萄球菌病原的实验室诊断和相关疾病的防治提供参考。

1 材料与方法

1.1 病料组织

无菌采集的贵阳市花溪区农贸市场附近某养殖户病猪的喉、气管、肺脏等组织样品。

1.2 主要试剂

革兰氏染色液试剂盒，购自北京索莱宝科技有限公司（Solarbio）；Taq PCR MasterMix for PAGE，购自杭州昊鑫生物科技股份有限公司；抗菌药物药敏纸片，购自杭州驰成医药科技有限公司；细菌微量生化反应管，购自南京全隆生物技术有限公司；其他试剂均为国产分析纯。

1.3 PCR扩增引物

细菌16S通用引物（预扩增 片 段 1 481bp） F：5’-AGA GTTTGATCATGGCTCA G-3’，R ：5’-TACGGTTACCTT GTTACGACTT-3’。……