大黄和肉桂乙醇提取液对人参病原菌抑菌活性研究

2022-04-15徐鸿雁卫佳丽王洪伟刘丽娟

人参研究 2022年2期

徐鸿雁，卫佳丽，王洪伟，刘丽娟*

（1.通化市园艺研究所，通化 134001；通化师范学院生命科学学院，通化 134002）

人参栽培生产中，频发多种病害，常使用化学农药用于防治，可能导致农药在药材和土壤中残留。生物源农药可降低或避免化学农药带来的“农药公害”。中药材大黄[1]具多类药效活性成分，以蒽醌类、二蒽酮类、鞣质类和多糖研究最多[2]，有泻热通肠、凉血解毒、利湿退黄等功效[3]。肉桂树皮入药，肉桂的嫩枝(桂枝)、幼嫩果实(桂丁)、叶亦供药用[4]，含挥发类成分有很好的抑菌作用，也广泛用于饮料、食品的增香、医药配方、调和香精[5-7]。本实验则以大黄和肉桂为材料探究其粗提物对人参枯萎病、人参立枯病和人参根腐病的病原菌抑菌效果比较，为人参病害生物防治提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料及材料处理

人参枯萎病、人参立枯病和人参根腐病的病原菌源自吉林农业大学，接于PDA平板培养基，于28℃恒温培养7天进行活化，备用。

药材大黄、肉桂均购于药店，75℃烘干后粉碎，选用95%、80%、60%的乙醇分别对大黄、肉桂粉末浸提48h，2000r/min离心10min取上清液，减压回收乙醇，浓缩液挥干乙醇以水定容至5mL，使药液浓度为1g/mL。以60%乙醇浸提大黄的，80%乙醇浸提肉桂的药液抑菌效果最佳，用做本实验使用药剂。

1.2 方法

PDA培养基灭菌后冷却至50℃左右，加入大黄、肉桂的提取药剂，制成质量浓度为50、25、12.5、6.25μg/mL的带药培养基。在无菌条件下将活化的菌种接种于该培养基上，37℃培养5~7d，每个处理3次重复，无添加药剂为对照。

1.3 菌落直径的测量与计算

用十字交叉法测量菌落直径，取3次测量数据平均值。

菌落直径（mm）=测量菌落直径平均值-5.0

抑菌率（%）=（对照组菌落直径-菌落直径）/对照组菌落直径×100

2 结果与分析

2.1 肉桂的80%乙醇浸提物对人参病原菌的抑制效果

图1 肉桂提取剂对人参病原菌抑制效果

从表1可知，肉桂提取剂对人参立枯病的抑制效果最好，浓度大于12.5μg/mL时抑制率均达100%（效果见图1，B-2、B-3、B-4），浓度为6.25μg/mL时，也高达86.11%（效果见图1，B-1）。肉桂醇提液浓度为50μg/mL（效果见图1，A-4）时对枯萎病的抑制率达到100%，当浓度12.5μg/mL时，抑菌率略高50%（效果见图1，B-2）。50μg/mL肉桂乙醇提液对根腐病抑制率为80%（效果见图1，C-4），低于其他2种病原菌，所有处理抑菌率均大于60%，相同浓度时强于对枯萎病的抑菌效果。

表1 肉桂乙醇提取液对人参病原菌抑菌率（抑菌率：%）

综上，肉桂对立枯病抑制效果最好，可选用12.5μg/mL药剂浓度抑制立枯病，对枯萎病菌的抑制选用50μg/mL的药剂浓度,药剂浓度12.5~50μg/mL之间（效果见图1，C-1~C-3）对根腐病抑制效果相信仿，差别不明显。

2.2 大黄对人参病原菌的抑制效果

根据表2可知大黄醇提液在浓度为50μg/mL时，对立枯病的抑制率为100%(效果见图2，D-4)，25μg/mL时抑制率高达95%(效果见图2，D-3)，12.5μg/mL时抑制率为87.77%，可见大黄醇提液对立枯病的抑制效果好。对枯萎病和根腐病的抑制效果相仿，药剂浓度为50μg/mL时对枯萎病(效果见图2，C-1)和根腐病的抑制率均达到80%(效果见图2，E-1)。

图2 大黄的提取剂对人参病原菌抑制效果

表2 大黄乙醇提取液对人参病原菌抑菌率（抑菌率：%）

综上，可选用大黄对人参立枯病进行防治，选用60%乙醇溶液作为提取溶剂，药剂浓度选用50μg/mL，对抑制枯萎病和根腐病的抑菌浓度也选用50μg/mL。

3 小结与讨论

3.1 大黄和肉桂的提取

选用大黄和肉桂进行对人参土传病害防治效果研究，经不同乙醇浓度浸提对比表明，选用80%乙醇作为肉桂的提取溶剂，60%乙醇溶液作为大黄的提取溶剂较好。

3.2 大黄和肉桂提取剂对人参立枯病、枯萎病和根腐病的防治效果

大黄和肉桂的乙醇提取物对人参立枯病的生物防治效果最好，肉桂提取物浓度大于12.5μg/mL时抑制率均达100%，大黄提取物浓度大于12.5μg/mL时抑制率均达87%。肉桂和大黄均可用于人参立枯病的生物防治，乙醇提取液最适抑菌浓度肉桂选用12.5μg/mL，大黄50μg/mL.肉桂和大黄对人参枯萎病和根腐病也有抑制效果但略逊于立枯病，可使用乙醇提取液浓度50μg/mL防治。