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艾烟对动脉粥样硬化小鼠抑制机制研究

2022-03-22康虹亮易睿张楠邱潜伍江涛李兵

医学概论 2022年1期

康虹亮 易睿 张楠 邱潜 伍江涛 李兵

摘要:目的:人们日常生活中用艾叶燃烧的艾烟对发生的心血管疾病动脉粥样硬化的保护作用。方法:小鼠作为实验对象,建立动脉粥样硬化模型,我们以单纯高脂饲料喂养,为期12周,建造小鼠动脉粥样硬化模型。我们用艾叶中燃烧的艾烟,之后再使用它干预小鼠,进行观察和记录。其主要分四个步骤,艾烟的充分燃烧、小鼠动脉粥样硬化模型的建立、分组实验观察记录、数据分析。结果:艾烟使动脉粥样硬化小鼠的TC,TG,HDL,LDL全部都大幅度的下降,八周龄小鼠高脂饮食喂养十二周以后,体重以及血脂变化都出现了异常,相对于正常小鼠,APOE体重减轻,TG,LDL,VLDL含量增高,HDL含量下降.结论:艾烟进行烟熏12周可以有效降低TG,LDL的水平,可以调整小鼠血脂水平。

關键词:艾烟,动脉粥样硬化小鼠,抑制机制

艾烟是艾绒燃烧的产物,艾的药性成分可能存在其中。古代文献中有用艾烟治疗疾病的记载,如在《圣济总录》、《本草纲目》《神农本草经疏》等古籍中,有将艾叶做卷后点燃,口吸艾烟以治疗咳嫩,鼻吸艾烟治疗牙痛,熏艾治疗病疾,掩口不愈等记载。研究发现,艾烟在胆固醇代谢,血液流变方面有一定的良性调整作用。而对于艾烟是否为艾灸抗动脉粥样硬化的起效因素之一,国内外未见报道。本研究以小鼠为研究对象,以艾艾烟暴露为干预方法,观察艾烟干预对小鼠生存状态、血脂、血清炎性指标、主动脉粥样硬化斑块、肝脏病理,以及胆固醇摄取和胆固醇逆向运转机制的影响,以期从抑制炎症、改善胎代谢障碍等途径阐释艾灸、艾烟的作用机制。

1、材料与方法

  1.   30只8周龄的Apoe小鼠随机分为2 组:模型组以及艾烟组,每组15只。15只小鼠作为正常对照,小鼠喂养一周后,进行实验干预,干预方法如下:正常组:采用小鼠固定器固定小鼠,不进行干预;模型组:采用固定器固定小鼠四肢,不进行干预;艾烟组:将小鼠固定后放入自制玻璃缸,玻璃钢内有调试好的粉尘仪。点燃艾条,从玻璃缸的上方的圆孔中插入,令艾烟充满玻璃缸测试其浓度在5mg/m³ 到15mgm³时将艾条取出,然后封闭圆孔。并且每隔三分钟就记录一次浓度数值,数值过高或者过低都需要及时补充。
  2. 统计学方法  应用SPSS23.0统计软件进行相关数据分析,计量数据以(±s)表示,采用Fisher确切概率法检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1实验前普通小鼠和APOE小鼠皮毛乌黑有光泽, 且活波好动 , 但在实验结束时 , 小鼠皮毛灰暗干涩并出现多处脱落。实验前各组小鼠体重无差异 ,随时间增长各组小鼠体重逐渐增加 ,干预12周后,各组小鼠体重呈现正常组模型 组 、 艾烟组的趋势 。 模型组小鼠体重显著低于正常组(p=0.001) ; 艾烟组小鼠体重与模型组没有特别大的差异,且都具有统计学意义(P<0.05)。

模型组小鼠血清TG,LDL含量显著高于正常组,HDL含量显著低于正常组,血清TC与正常组无差异。艾烟组小鼠血清TG,LDL含量显著低于模型组,HDL含量与模型组无显著差异(见表1)。

3、讨论

现代研究已经发现艾烟中含有多种活性成分,可以通过呼吸系统和血液循环系统,达到抗炎杀菌、调节免疫、抗氧化、调节自主神经功能,调节胆固醇代谢等多种效果。艾烟具有杀菌、抗病毒的作用,可抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒軒菌、结核杆菌等还可抑制流感病毒、腺病毒、鼻病毒等可用于治疗呼吸系统疾病。同时艾烟还可局部作用于皮肤,治疗局部皮肤感染,如足癣、外伤感染等艾烟的提高免疫,抗氧化作用表现在艾烟可以调节细胞因子平衡,抑制(经脂多糖(诱导的)小鼠巨嗟细胞系(的释放和的表达“,提高血清抗氧化酶活性,抗氧化损伤,和清除自由基。艾烟可以良性调整心率变异性,提高心脏自主神经功能、并且研究发现,艾烟在胆固醇代谢,血液流变方面有一定的良性调整作用。一定浓度艾烟暴露可以降低高脂血症大鼠、升高,降低血柴枯度。还可降低大鼠血清中和血管性假血友病因子水平,升高并认为,艾烟可以通过呼吸进入机体,并最终进入血液循环,可能对心血管系统具有一定的的作用。

研究表明Toll受体 (Toll-like receptors TLRs) 作为免疫细胞表面识别病原相关分子模式的一个模式识别受体家族, 与天然免疫反应有着密切的关系, TLR4是其中发现较早同时也是目前研究较多的Toll受体, 在血脂代谢紊乱和慢性炎症的相互作用起着重要桥梁作用, 一方面氧化修饰的血清脂蛋白可通过TLR4受体激活免疫细胞, 介导TNF-α、IL-1、IL-6等炎症因子的释放, 同时炎症细胞因子也可以促进脂蛋白的氧化, 使具有生物活性的氧化修饰的脂蛋白的比例和含量均升高促进脂质沉积。目前多数研究认为Hcy导致的内皮功能障碍是动脉粥样硬化的重要机制。NO是内皮细胞维持血管扩张的主要调节因子, 而血管内皮在成生NO过程中出现异常, 使NO生成减少, 导致内皮功能障碍, 是动脉粥样硬化的前奏。

高脂饲料喂养法建立的模型以脂质沉积为主要特征,操作性强,也较常被采用,但其造模时间较长,且形成的斑块位置不固定,从而人们在此基础上进行改进,免疫法、神经及机械损伤法、血流动力改变法、基因工程法等建立动脉粥样硬化动物模型的方法应运而生,这些方法都能加速模型的建立,也各有优缺点,它们与人类自发型的动脉粥样硬化存在一定差异,在研究动脉粥样硬化并发症时,部分结扎颈动脉法发挥了不可替代的作用;球囊损伤法形成的斑块位置确切,便于研究者实施各种干预措施后观察斑块的变化;免疫法建立的模型可为研究疫苗预防动脉粥样硬化提供线索,因此人们可根据自己的需要选择比较合适的造模方法。

目前,动脉粥样硬化的研究已是全国共通的话题,在美国也有大量的研究,在美国,每年约785 000人新发冠心病(CAD),约470 000人再发CAD。2007年美国平均每6个死亡病例中有1例死于CAD。尽管脑卒中发生率下降,但美国2007年的死亡数据显示每18个死亡病例中有1例死于脑卒中。血脂异常是CAD最主要的危险因素,甚至是CAD的首要条件。流行病学资料也显示高胆固醇血症以及冠状动脉粥样硬化是缺血性脑卒中的危险因素。冠心病流行病学和预防美国是冠心病高发病国家,全国共有冠心病患者约400万,每年约有70万心肌梗塞发作。1949年开始了Framingham地区冠心病流行病学研究,研究出吸烟、高血压、高血脂、超体重、缺少运动、糖尿病、阳性家族史等为主要的易患因素。研究对象目前尚有60%存活。

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项目基金:2021年湖南省大学生创新创业项目:湘教通[2021]197号-3904;2021年长沙医学院大学生创新创业训练计划项目:长医教[2021]47 号-059

*通讯作者:李兵,(1987-11-),男,本科,讲师,解剖学专业

第一作者:康虹亮(2001-12-),男,本科在讀,临床医学专业

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