毛佳， 吴险平， 王宏宝*， 王晓飞， 高玉侠

(1.江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所，江苏 淮安 223001； 2.淮安市农业科技实业总公司，江苏 淮安 223001；3.淮安市淮安区农业技术推广中心，江苏 淮安 223200)

根结线虫(Meloidogyneincognita)是危害最严重的植物病原线虫之一，在世界各地广泛分布，可寄生于3 000多种植物，尤以茄科、葫芦科和十字花科等植物受害严重[1]。据估计，全世界农业生产每年因各类灾害造成的总损失中，根结线虫的危害约占到5%左右，多达500亿美元。黄瓜作为我国重要蔬菜种类，近年来随着日光温室黄瓜栽培面积的逐步扩大和复种指数的提高，根结线虫危害日趋严重，并已成为黄瓜生产中的主要障碍，一般危害造成减产20%～30%，严重的达70%以上，甚至绝收[2-3]。近年来，由于根结线虫危害严重，给蔬菜产量造成极大损失，对当地农业的可持续发展带来极大影响，有一些关于中低毒药剂和生防菌防治根结线虫病方面的试验报道[4-8]，然而在氯溴异氰尿酸及植物源材料槟榔粉等方面的报道较少。为解决生产中根结线虫病的防治难题，本文通过不同外源物对根结线虫室内活性及盆栽等药效进行测定，研究了南方根结线虫与土壤理化性质对不同外源物的响应，以期为南方根结线虫病综合防控提供技术参考。

1 材料与方法

1.1 供试药剂

试验供试外源物为40%辛硫磷乳油(连云港立本作物科技有限公司)，1.8%阿维菌素乳油(连云港立本作物科技有限公司)，50%氯溴异氰尿酸可溶粉剂(南京南农科技发展有限公司)，25%噻虫嗪水分散粒剂(江苏宝灵化工股份有限公司)，槟榔粉(提取比例15∶1，质量比，宝鸡市方晟生物开发有限公司)。

1.2 幼虫准备

在温室内盆栽番茄繁殖南方根结线虫。将番茄种子播种在育苗床中，20 d后稍显粗壮时移为盆栽。接种南方根结线虫，1个月后，根部会产生大量卵囊。将根取出并洗去泥土，用镊子挑取卵囊置于培养皿中，用0.5%的次氯酸钠处理3 min，再用无菌水冲洗3次，置于25 ℃培养箱中进行孵化。3 d左右就会孵化出大量2龄幼虫(J2)，生物检测备用[9]。

1.3 外源物对南方根结线虫活性试验

各种药剂分别配制100倍液和150倍液2份母液备用，同时配置约200条·mL-1的线虫悬浮液备用。用移液枪吸取0.5 mL线虫悬浮液置入5 mL离心管后，各浓度线虫处理液容积统一设定为2 mL，根据总容量分别计算对应400、600、800、1 200、1 600、2 400倍液所需要的母液量和用水量。配置处理液时，先将计算好的用水量加入离心管的线虫悬浮液中，接着加入不同稀释倍数所需的母液量。将配置好的不同倍数处理液摇匀后置于试管架上，在25 ℃黑暗培养箱中分别处理24 h，镜检观察线虫死亡率。镜检时分别将处理液倒入凹面皿中并置于体视显微镜下统计存活状态，线虫存活状态通过针刺法测定，即线虫僵直不动为死虫，弯曲蠕动状态为活虫[10]。试验通过计算不同外源物对线虫的击倒率(矫正死亡率)来测定线虫对各外源物的敏感性。空白对照设为清水组，每个处理重复3次，每个处理的线虫数量约为100条。

1.4 外源混合物对南方根结线虫盆栽药效试验

试验作物：黄瓜，品种为冬美906，由天津德瑞特种业有限公司生产。将黄瓜种子(盆栽3颗种子)种在透明塑料杯中(口径10 cm，高15 cm)，每盆土样重0.5 kg，土壤中每100 g干土中2龄幼虫数量为38.4条。出苗后保留2株用于试验，待黄瓜苗2叶期进行灌根处理，共设5个盆栽处理和1个空白对照，每个处理用药情况见表1，处理期间每2 d浇少许水以保持土壤湿度，处理30 d后观察统计根部侵染情况，每个处理重复10盆。药效调查采用数根瘤法，每个处理取5盆统计根结(瘤)量，计算根结减退率[11]。

表1 各处理不同外源物的混合比例

1.5 土壤理化指标测定

方法1.4中统计根结数量后的盆栽土壤按照不同处理分别混合均匀后自然阴干过筛、分装、检测，测定指标及测定方法参照王宏宝等[12-13]报道的土壤理化指标测定方法，即土壤多酚氧化酶活力测定采用紫色没食子素比色法，土壤脲酶活力采用靛酚蓝比色法，蔗糖酶活力采用3,5-二硝基水杨酸比色法，纤维素酶活力采用蒽酮比色法，土壤有机质采用重铬酸钾容量法，全氮采用凯氏定氮法，全磷采用钼锑抗比色法，pH采用pH计测定，每个指标测定重复3次。

1.6 数据处理

采用Excel 2019和DPS 7.05软件进行数据统计和差异显著性分析。

2 结果与分析

2.1 外源物对南方根结线虫J2活性的影响

表2显示，线虫在氯溴异氰尿酸和阿维菌素不同浓度下时对线虫活性高，2种药剂在稀释2 400倍液时击倒率仍达70%左右；而噻虫嗪仅在400倍液下对线虫的击倒率为97.0%，其他浓度下击倒率较低；槟榔粉在400～600倍液处理下表现出较好的击倒率，辛硫磷在800倍液下击倒率为51.7%，其他浓度处理击倒率低。

表2 不同外源物对南方根结线虫J2的击倒率

2.2 各处理对南方根结线虫的盆栽药效

图1、图2显示，随着氯溴异氰尿酸含量的增加，根结线虫侵染引起的根结数量逐渐降低，其中，20%和40%的氯溴异氰尿酸混合物处理(图1中处理4和处理5)后根结数量减退率显著降低，防控效果达到了68.4%和77.9%(图2中处理4和处理5)。

1—2.5%氯溴异氰尿酸混剂0.1 g；2—5%氯溴异氰尿酸混剂0.1 g；3—10%氯溴异氰尿酸混剂0.1 g；4—20%氯溴异氰尿酸混剂0.1 g；5—40%氯溴异氰尿酸混剂0.1 g。图2 同。图1 各处理对黄瓜根部根结数量的影响

图2 各处理对盆栽黄瓜线虫病的防控效果

2.3 土壤生物酶及理化性质对各处理的响应

土壤生物酶对氯溴异氰尿酸与槟榔粉混合物的响应见表3，土壤多酚氧化酶除了处理2有所下降外，其他处理土壤多酚氧化酶与对照相比，含量均有所提高；土壤纤维素酶变化显示，处理1、4、5与对照相比，促进了纤维素酶含量的增加，而处理2、3则抑制了土壤纤维素酶含量的增加。土壤脲酶含量变化显示，不同处理正向促进了土壤脲酶含量增加，但各处理与对照间差异不显著；土壤蔗糖酶变化显示，不同处理作用下，土壤蔗糖酶含量均有所增加，其中，处理2、3、4、5对土壤中蔗糖酶正向促进效应显著。

表3 土壤生物酶对氯溴异氰尿酸与槟榔粉混合物的响应

土壤理化性质对氯溴异氰尿酸与槟榔粉混合物的响应见表4，氯溴异氰尿酸与槟榔粉混合物促进了土壤全磷含量的增加，其中处理1、2、3、4土壤全磷含量与对照相比显著增加。土壤pH变化显示，与对照相比，混合物处理后，pH有所下降，处理2和处理3达到显著性差异，其他处理不显著。土壤有机质变化显示，混合物处理后，有机质有所增加，差异不显著；土壤全氮分析显示，处理2、4、5与对照相比差异显著，即氯溴异氰尿酸与槟榔粉混合物(外源物)施用后对土壤全氮起到了正向效应，表现为土壤全氮含量有所增加。

表4 土壤理化性质对氯溴异氰尿酸与槟榔粉混合物的响应

3 小结与讨论

王金柱等[13-14]报道了50%氯溴异氰尿酸可溶粉剂对小麦、大豆、西瓜、生姜等作物土传病害有较好的防效，且在试验剂量内对作物安全。50%氯溴异氰尿酸可溶粉剂37.5～45.0 kg·hm-2处理对小麦纹枯病、小麦根腐病、大豆根腐病、西瓜枯萎病、西瓜蔓枯病、姜瘟病和姜茎基腐病的防效分别为85.7%、64.4%、70.4%、90.0%、80.0%、100.0%和100.0%。本试验发现，氯溴异氰尿酸单剂及混配制剂对根结线虫的防控效果明显，同时分析了不同比例氯溴异氰尿酸与槟榔粉混合物对土壤理化性质的影响，发现该混合物施用后对土壤全氮、全磷、有机质、土壤脲酶、土壤蔗糖酶起到了正向促进效应，同时对土壤pH有一定调控作用，可以作为一种土壤调理剂在生产中运用。