李沙

【摘要】目的：对电化学发光法和液相色谱-串联质谱法检测25-羟基维生素D进行评价分析。方法：收集200份血清样本，分别进行液相色谱-串联质谱法检测和电化学发光法检测，评价相关性及一致性。结果：两种方法检测25-羟基维生素D总浓度无明显差异性，P>0.05。相关性及一致性好。结论：电化学发光法和液相色谱-串联质谱法在25-羟基维生素D检测中的相关性及一致性好。

关键词：电化学发光法;液相色谱-串联质谱法;25-羟基维生素D

【Abstract】Objective： To evaluate and analyze the detection of 25-hydroxyvitamin D by electrochemiluminescence and liquid chromatography-tandem mass spectrometry.Methods： 200 serum samples were collected and detected by liquid chromatography-tandem mass spectrometry and electrochemiluminescence respectively.Correlation and consistency were assessed. Results： There was no significant difference in the total concentration of 25-hydroxyvitamin D detected by the two methods， P>0.05. Good correlation and consistency. Conclusion： Electrochemiluminescence and liquid chromatography-tandem mass spectrometry have good correlation and consistency in the detection of 25-hydroxyvitamin D.

Key words： electrochemiluminescence; liquid chromatography-tandem mass spectrometry; 25-hydroxyvitamin D

維生素D是人体健康发展所必须的重要营养元素，维生素D补充情况将会对人体正常的磷和钙代谢产生影响，密切联系人体健康，所以，维生素D水平测量结果的准确对预防和治疗多种代谢相关疾病具有积极意义。在人体血液中，维生素D主要是以25-羟基维生素D的形式运输，这也是评价人体内部维生素D营养情况的有效标准。电化学发光法和液相色谱-串联质谱法等可对25-羟基维生素D浓度进行检验，同时基于测定结果评价人体内维生素D情况。

1.材料和方法

1.1一般材料

收集200份样本进行试验，并且按照试验需求均进行液相色谱-串联质谱法检测和电化学发光法检测。

1.2实验方法

电化学发光法采用电化学发光全自动免疫分析仪及相关配套试剂盒进行，样品检测操作流程按照试剂盒说明标准进行。液相色谱-串联质谱法设置色谱柱c18柱，流动相A相为0.1%甲酸水溶液，B相为流速0.3ml/min甲醇，进样体积为1.5μL，柱温为35℃进行梯度洗脱。质谱条件采用电喷雾电离，正离子模式 （ESI+）进行多反应监测。

1.3统计学处理

采用SPSS24.0进行数据统计，计量资料t检验，P<0.05存在统计学意义。Kappa分析比较两种方法一致性。

2.结果

用两种方法分别检测200份血清样本中25-羟基维生素D水平。结果显示，电化学发光法检测后25-羟基维生素D总浓度分布范围为9.11～115.25nmol/L，平均（42.04±10.22）nmol/L;液相色谱-串联质谱法检测后25-羟基维生素D总浓度分布范围为9.24～113.76nmol/L，平均（42.55±10.24）nmol/L。两组比较，t=1.320，P>0.05。Spearman相关系数r=0.811（95% CI：0.753～0.844），ICC=0.761（95% CI：0.712～0.805）。

3.讨论

维生素D在人体内可转变成为25-羟基维生素D，在人体全血或者血清之中，25-羟基维生素D的含量可充分的将人体维生素D的营养情况作出充分反应。目前25-羟基维生素D常见检测方法有酶联免疫法、电化学发光法、放射免疫法以及液相色谱-串联质谱法等。液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）处理样品之后选择应用液相色谱实现分离，使用串联质谱仪设备作为检测仪器，在经过多种反应检测扫描模式处理后，对碎片离子和分子离子展开两次质量选择，同时凸显出其对25-羟基维生素D检测的灵活性、准确性和特异性。液相色谱-串联质谱法为目前最广泛的定量测定方法，亦被视为金标准。

本次研究将液相色谱-串联质谱法检测和电化学发光法检测同步用于25-羟基维生素D检测，以评价两者一致性。结果显示，两种方法检测25-羟基维生素D总浓度无明显差异性，P>0.05。相关性及一致性好。

综上所述，电化学发光法和液相色谱-串联质谱法在25-羟基维生素D检测中的相关性及一致性好。

参考文献

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