姜仕林，赵伟琼，苗莉云，刘婷，宋发军，张鹏*

（1 中南民族大学 生命科学学院，武汉 430074；2 山西中医药大学 基础医学院，晋中 030619）

植物内生菌是指存在于宿主植物的健康组织中，且不会损害宿主植物的微生物［1］，研究发现内生细菌具有促进植物生长和药用物质合成等作用［2-3］.黄芪（Astragalus membranaceus，A.membranaceus）是我国传统中药材，黄芪皂苷是其主要药用成分之一［4］.目前，人工种植黄芪已成为黄芪药材的主要来源.有益微生物菌剂具有提高作物产量、改善品质、减少化肥用量等作用［5］.利用有益微生物改良和提高黄芪的人工种植技术，可为规模化和标准化人工种植黄芪的技术开发奠定基础.

本课题组前期分离自5年生重楼根状茎的沙雷氏菌SCR21026对小麦幼苗具有明显的促生作用［6］，为进一步分析沙雷氏菌SCR21026对植物生长的影响，采用黄芪作为研究对象，探讨该菌对黄芪幼苗的生长指标、生理指标以及黄芪皂苷合成相关基因表达的影响.

1 材料与方法

1.1 实验材料

沙雷氏菌SCR21026分离自5年生重楼的根状茎［6］.膜荚黄芪种子由山西中医药大学苗莉云老师提供.Trizol试剂和一步法反转录荧光定量试剂盒购于生工生物工程（上海）公司.引物由武汉奥科鼎盛合成（表1）.

表1 引物序列Tab.1 primer sequences

1.2 沙雷氏菌SCR21026与黄芪幼苗的共培养以及样品采集

（1）将沙雷氏菌SCR21026用LB培养基活化培养过夜后，按照1%转接量转接到新鲜LB培养基中，28℃、150 r·min-1培养5 d，离心收集菌体并用0.9%生理盐水稀释至OD600=1.0，备用.（2）将育苗盘划分为64个5 cm×5 cm的方孔，每孔种植黄芪种子20粒，待黄芪幼……