刘文兰，王莉，杨扬，闫瑾，朱丹，李怡琛

(西安医学院医学技术学院，陕西 西安 710021)

白内障指眼部晶状体混浊，是世界上致盲的主要因素，占所有致盲病例的47.8%[1-3]。囊外晶状体纤维摘除和人工晶状体植入等手术是治疗白内障的主要手段[4-5]。然而，白内障手术后可能导致继发性晶状体混浊，也称为后囊膜混浊(posterior capsule opacification，PCO)，是术后最常见的并发症[6-8]。术后残留在前囊膜周边部和赤道部的晶状体上皮细胞(lens epithelial cells，LECs)增殖并迁移到后囊，并且进行上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)是PCO发展中的一个关键过程[9-10]。LECs在EMT过程中失去上皮细胞的特征，包括上皮细胞的标志物E钙粘蛋白(E-cadherin)的下调和间质标记物如α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)水平上升，从而获得间充质特性，并合成细胞外基质[11]。因此，抑制EMT是治疗PCO的关键环节。目前，microRNAs参与调节多种生理和病理过程已被学界普遍认同[12]。此外，最近的证据[13]表明，许多miRNA在晶状体发育和白内障发生中发挥着重要作用。据报道[14-15]，MicroRNA-146a(miR-146a)是许多肿瘤包括胃癌、前列腺癌和乳腺癌的已知肿瘤抑制因子，并参与调节细胞增殖、迁移、凋亡和EMT等多种细胞生理和代谢机制。本研究拟探讨miR-146a在调节LEC细胞EMT中的关键作用。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器设备

HLE-B3购自上海赛百慷公司；Dulbecco’s改良鹰培养基(Dulbecco’s modified eagle medium，DMEM)培养基(Gibco，USA)、miR-146a的模拟物(miR-146a mimics)和阴性对照模拟物(miR-NC)均购自上海生工生物有限公司；转化生长因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)、总核糖核酸(ribonucleic acid，RNA)提取试剂盒(Tiangen，Beijing)、M-MLV逆转录酶、SYBR Green qPCR Master Mix试剂盒、实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR)扩增产物由上海生工生物设计合成；放射免疫沉淀分……