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基于高通量测序的RNA相互作用研究方法概述

2021-12-26李星桥

科学与信息化 2021年19期
关键词:实验信息方法

李星桥

武汉大学生命科学学院 湖北 武汉 430072

引言

RNA分子在细胞内并不是单独行使功能,而是通过与其他生物分子如DNA、RNA、蛋白质等发生交互来共同完成功能,RNA分子具有碱基互补配对的内在属性,使得其能形成更加复杂的结构从而适应于多样的生物学功能。RNA相互作用,是指RNA分子内部以及不同RNA分子间结合形成双链结构共同调节生物体功能[1]。这些互作信息对于理解RNA的生物学功能机制有着十分重要的作用。例如,mRNA的3’UTR目标区域可以被miRNA结合并抑制其翻译,lncRNA可以和mRNA结合促进其翻译[2],而RNA分子自身也能形成双链,从而产生更加复杂的二级结构,进而与RNA结合蛋白结合并发挥功能。因此,如果我们能准确地获取细胞内部的RNA相互作用信息,将可以解释许多分子生物学功能和机制。

近年来,细胞内大规模地研究RNA相互作用的方法都是基于高通量测序技术开发。这些测序技术能够用于检测转录组范围的RNA互作,主要包括了PARIS[3],RIC-seq[4],hiCLIP[5]等测序方法。然而,RNA相互作用在生物体内是动态变化的,且不同的实验技术之间存在偏好性,所能检测到的RNA种类不同,此外部分实验方法依赖于特定RNA结合蛋白,因此不同的技术得到的RNA互作信息存在差异。根据具体的分析需求,我们应该采用合适的方法用于RNA互作研究。

1 PARlS技术原理介绍

在RNA互作研究中,各种新技术层出不穷,PARIS(Psoralen analysis of RNA Interactionsand Structures)是其中较为优秀的一种方法。PARIS技术利用了一种特殊的化学分子AMT[6],该分子在365nm的紫外光照射下,可将细胞内RNA双链区域中的AU碱基对进行交联,这种交联是基于空间位置。……

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