付海洋 李 敏,2 于 浩,2 付步芳 王召旭

1.中国食品药品检定研究院医疗器械检定所，北京 102629；2.烟台大学生命科学院，山东烟台 264000

近年来血管支架从材料到工艺都在不断优化发展，为了能够更好地评价这类医疗器械的性能，各种评价方法不断发展[1-4]。传统的动物实验是目前主要评价手段，但该类方法耗时长、影响因素过多。体外组织学评价具有细胞评价和动物评价不可替代的特点，比如其既可模拟动物体内的生理环境和流体力学环境，又可通过设置参数、添加试剂成分控制各种条件，以探究各种因素所产生的作用。但目前体外组织学评价研究受限于体外血管组织培养，发展缓慢，面临的难点主要是在保证无污染血管长期存活的基础上维持血管的组织结构和生理功能[5-8]。本研究主要旨在解决两个问题：一是如何实现长期无污染培养，二是研究应力对血管结构的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物

成年健康新西兰家兔3 只，体重2.5～3.0 kg，SPF 级，性别不限，由中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所提供。实验动物生产许可证号：SCXK（京）2019-0017 号，实验动物合格证号：NO.110317201100 0144，伦理号：中检动（福）第2019（A）054 号。

1.2 试剂

MEM 培养基（HyClone）；胎牛血清（Gibco）；青链霉素双抗溶液（Gibco）；Masson 染色试剂盒（Solarbio）；10%三氯化铁水溶液（上海铭博生物）；1%碘液（Solarbio）。

1.3 仪器

BOSE ElectroForce 5200 BioDynamic 生物反应器。

1.4 实验方法

1.4.1 分组 每只新西兰家兔取两侧颈动脉，各长8～10 cm，取2 cm 做静态培养对照，另外各取3～4 cm（其中2 cm 用于检测，两头多出部分用于固定）做25、50、80 ml/min 动态培养，每组重复3 次。以下简称静态组、25 组、50 组、80 组。……