张 微 李志新 赵 雪 张金鹏 付春江 于倩倩 刘卫平

（黑龙江省农业科学院克山分院，161600，黑龙江齐齐哈尔）

马铃薯X病毒（potato virus X，PVX）是马铃薯最常见的病毒之一，其感染症状是叶片变小，花叶、叶片上有大小不等的黄绿色斑驳等，可使马铃薯产量降低10%～50%。马铃薯Y病毒（potato virus Y，PVY）是危害马铃薯、烟草等茄科植物的主要病毒之一，其感染症状是重花叶、叶脉坏死和出现褐斑等，可导致马铃薯减产 20%～50%。在田间，PVX与PVY常复合侵染，造成马铃薯严重减产，甚至绝产。我国马铃薯生产受病毒病危害非常严重，在各主要产区如黑龙江、河南等地多为复合侵染[1-3]。目前，马铃薯感染病毒后主要通过电子显微镜、DAS-ELISA（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）和PCR等方法[4-6]进行检测，但此类方法在生产上的应用具有很大局限性[7]。胶体金免疫层析技术（gold immunochromatography assay，GICA）是将胶体金标记、免疫检测、层析分析、单（多）克隆抗体和新材料等结合在一起的技术，具有操作简便、快速、结果准确、无需特殊设备等优点[8]，在医学、动植物检疫、食品安全监督等领域得到广泛应用[9-12]。在马铃薯上已研制出 PVX和PVY单重胶体金检测试纸条[13]。目前，多重马铃薯病毒的检测多使用分子生物学方法[14]，而关于多重马铃薯病毒胶体金检测试纸条的研究尚未见报道。为此，本试验研制定性检测PVX和PVY的双重胶体金试纸条，为马铃薯病毒病的田间检测提供一种快速的方法。

1 材料与方法

1.1 试验材料

PVX和 PVY为本研究室从马铃薯上分离得到。病毒分别摩擦接种繁殖于心叶烟（Nicotiana glutinosa）上。马铃薯 S病毒（PVS）、卷叶病毒（PLRV）、M病毒（PVM）和A病毒（PVA）为本研究室保存。……