高亚东，朱 安，李璐迪，张 涛，王 硕，单丹萍，李盈姿，王 旗,2,3,△

(1.北京大学公共卫生学院毒理学系，北京 100191；2.国家中医药管理局中药配伍减毒重点研究室，北京 100191；3.食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室，北京 100191)

吴茱萸(Evodiaefructus)始载于《神农本草经》，为临床常用的传统中药，具有散寒止痛，降逆止呕，助阳止泻的功效。吴茱萸有小毒[1]，临床上常因服用生品吴茱萸、未制透的吴茱萸或超剂量服用而中毒，研究表明肝脏是吴茱萸的主要毒性靶器官[2-3]，但尚未阐明其毒性物质基础及毒性机制。吴茱萸碱(evodiamine，EVO)属色胺吲哚类生物碱，是吴茱萸主要生物碱成分之一，具有抗肿瘤[4]、抗炎[5]、抑菌[6]、镇痛[7]、神经保护[8]等药理作用。EVO可能是吴茱萸肝毒性的物质基础，其可降低人正常肝细胞L-02存活率，升高谷丙转氨酶(alanine transaminase，ALT)、谷草转氨酶(aspartate amino-transferase，AST)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)活性[9]，但其肝毒性机制尚不明确。动物实验发现吴茱萸肝毒性机制与氧化损伤相关[10]，可导致ALP活性和总胆红素(total bilirubin，TBIL)含量升高[3]，并促使肝细胞凋亡[11]。HepG2细胞具有许多肝脏特异性相关功能，是目前用于评估肝毒性的人源细胞模型之一，广泛应用于药物肝毒性及分子机制研究[12]，因此，本研究用HepG2细胞研究EVO的肝细胞毒性作用特点，从脂质过氧化损伤、凋亡和胆汁淤积三方面初步探讨其毒性机制。

1 资料与方法

1.1 细胞系

HepG2细胞由北京大学公共卫生学院毒理学系赵鹏老师惠赠。

1.2 药物及主要试剂

EVO由北京大学药学院天然药物学系杨秀伟教授提供，纯度≥98%。细胞增……