邢 俊，王 洁，黄晨阳，周建军

1南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心，江苏 南京 210008；2南京大学分子生殖医学中心，江苏 南京 210008

1 对象和方法

1.1 对象

收集2015年4月1日—2020年7月30日南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心行激素替代周期FET的1 598个单囊胚FET周期，其中常规FET周期1 495个，行PGT 助孕的PGT⁃FET 共103 个周期。103 个PGT⁃FET 周期中56 个周期为PGT⁃A，33 个周期为胚胎植入前染色体结构重排检测（preimplanta⁃tion genetic testing for structural rearrangements，PGT⁃SR），14 个周期为胚胎植入前单基因病遗传学检测（preimplantation genetic testing for monogenic dis⁃ease，PGT⁃M），均采用二代测序法进行全染色体拷贝数变异（copy number variant，CNV）分析，以筛选整倍体囊胚进行移植。排除了非高龄（＜35岁）、生殖道畸形、子宫腺肌症、子宫内膜异位症患者。所有患者签署知情同意书，其中进入临床PGT周期的患者均额外签署了PGT知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 治疗方案

本中心采用常规的控制性促排卵方案，监测患者外周血清性激素变化情况，同时阴道超声监测卵泡发育情况，当有2 个卵泡直径≥18 mm 时，注射人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG）5 000～10 000 U，36 h后行阴道超声介导取卵。

1.2.2 体外受精、胚胎培养和囊胚活检

取卵术中取出的成熟MⅡ卵母细胞行卵胞浆内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI），ICSI 术后16～18 h 进行原核观察，以受精卵出现双原核即2PN 为正常受精。在ICSI 注射后第3 天，使用激光在卵裂期胚胎透明带切1 个10 μm 的孔径。囊胚的评分由2位高年资胚胎学家依据Gardner囊胚评分标准进行评估［7-8］。使用5期和6期囊胚用于活检，用内径20 μm的活检针从孵出的囊胚滋养层中吸取5～10个细胞后，采用激光辅助切割。取下的细胞用磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered saline，PBS）洗涤后，转移至0.2 mL PCR管于-80 ℃冰箱储存。……