庄明亮，李剑飞，李志勇，葛蓬，王志

（吉林省养蜂科学研究所，吉林吉林132108）

关键字：蜜蜂；精液；超低温冷冻

蜜蜂是一种重要的经济昆虫，同时，蜜蜂也是一种重要的生态昆虫，其为农作物授粉产生很高的生态价值。随着生态的破坏和农药大面积的使用等因素，蜜蜂种质资源遭到破坏，保护蜜蜂种质资源越来越引起人们的重视。

蜜蜂种质资源保护通常采用群体水平上的活体保种技术，但活体保存风险性较高，受气候、蜜粉源及病敌害等外界因素影响较大[1]。蜜蜂精子冷冻技术能够将优质蜂种的精子低温下长时间冷冻保存，最大程度减少外界因素的影响，提高蜜蜂种质资源保护的可靠性[2,3]。因此，目前蜜蜂珍稀种质资源的保护除了采用群体水平上的活体保种技术以外，还采用细胞水平上的精子低温冻存技术。蜜蜂精子冷冻技术的出现，丰富了国家级蜜蜂基因库保种技术手段，为珍稀蜜蜂种质资源保护提供技术支撑，为蜜蜂遗传育种以及蜜蜂生物学科发展做出贡献。

精子冷冻保存从1803年问世以来，1964年Sawada和Chang首次利用7%的甘油作为冷冻保护剂成功的将蜜蜂精子保存，拉开了蜜蜂精子冷冻保存的序幕[4-6]。近几年蜜蜂精液低温冷冻保存技术取得了一些进步，2010年Hopkins和Herr利用10%二甲基亚砜（Dimethyl sulfoxide,DMSO）作为冷冻保护剂，缓慢降温至冰点以上平衡，解冻后蜜蜂精子活率达到93%[7]。2014年Wegener等[8]开发高渗透冷冻保护剂，然后用解冻后的精液进行人工授精，蜂王的产子区占整个子脾的47.5%。……