江晓晗 ， 胡 宜 ， 程 佳 ， 朱春燕 ， 刘 钢 ， 韩 博 ， 高 健

(1. 中国农业大学动物医学院 ， 北京 海淀 100193 ； 2. 上海市农产品质量安全中心 ， 上海 青浦 201708)

前期的流行病学调查结果显示，克雷伯菌是引起我国大型奶牛场中临床乳房炎的最常见致病菌之一，分离率为13.0%，仅次于大肠杆菌(14.4%)[1]。克雷伯菌性乳房炎临床症状一般较为严重，和大肠杆菌相比，产奶量损失的发生时间较早,持续时间较长，严重程度更高[2-3]。最近的研究结果显示，引起奶牛临床乳房炎的克雷伯菌主要是肺炎克雷伯菌(51.0%)和产酸克雷伯菌(49.0%)，两者分离率相当[4]。两种乳房炎源性克雷伯菌对关键毒力基因的携带率存在差异，但克雷伯菌对乳房炎的致病力不仅仅与毒力基因的携带情况有关，生长状况等也会影响炎症反应程度[5]。此外，细菌对乳腺上皮细胞的黏附和侵袭能力在乳房炎的发病机理中起着重要作用[6]。克雷伯菌的黏附和侵袭能力促进了急性乳房炎的发病，并可能导致急性乳腺炎向慢性感染转归[7]； 克雷伯菌的细胞毒性作用[乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)释放量]也反映了致使组织损伤的程度[8]。因此，在前期的流行病学调查基础上，本试验选择了临床乳房炎源性肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌各5株，旨在通过对比2种细菌体外生长状况、对乳腺上皮细胞的黏附、侵袭能力及致细胞损伤能力，初步探索两者的体外毒力差异。

1 材料与方法

1.1 菌株与细胞 本试验所用的肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌均来源于奶牛临床乳房炎奶样，患病奶牛均出现了较为明显的乳汁和乳房异常变化(乳汁呈水状、絮状、结块、黏稠等；……