张 新, 巨朝娟, 金 鑫, 熊朝晖, 赵 燕

（河北医科大学第一医院眼科，河北 石家庄 050031）

近视是指在放松状态下，平行光线经眼球屈光系统后聚焦在视网膜前的屈光状态。近年来，近视的发生率在我国呈上升趋势，其中病理性近视的发生会引起巩膜、视网膜和视神经病变，最终导致视觉损伤，严重影响青少年的正常生活［1-2］。Wnt/β -catenin 信号通路是机体中重要的信号通路，与动物胚胎组织发育、干细胞分化和细胞增殖密切相关［3］。前期研究［4-5］显示：形觉剥夺性近视（formdeprivation myopia，FDM）动物模型中巩膜成纤维细胞的Wnt/β-catenin 信号通路被激活。神经生长因子（nerve growth factor，NGF）是神经细胞生长调节因子，通过促进乙酰胆碱的合成激活Wnt/β-catenin信号通路，从而减轻胆碱能神经元的功能障 碍［6］。研究［7-9］显示：部分活性 因子如成 纤 维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）、转化生长因子（transforming growth factor，TGF）和胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor，IGF）等参与近视的发生发展过程。但目前国内外对NGF的研究较少，尚无关于NGF对FDM动物Wnt/β-catenin 信号通路影响的相关研究报道。本研究建立豚鼠FDM 模型，给予外源性NGF 干预，观察NGF 对FDM 的保护作用，并阐明其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物、主要试剂和仪器雄性豚鼠48只，2月龄，体质量100～130 g，购自中科生物制药股份有限公司，动物使用许可证号： SYXK（冀）2019-001。适应性饲养1周，饲养条件：室温25℃±2℃，相对湿度45%～55%，昼夜交替饲养，自由进水和摄食。复方托吡卡胺滴眼液和盐酸奥布卡因滴眼液（参天制药株式会社），NGF（美国Sigma公司），TRIzol 试剂（美国Invitrogen 公司），鼠抗糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase 3 β，GSK-3β）抗体和兔抗β-连环蛋白（β-catenin）抗体（美国Abcam 公司），鼠抗β-actin 抗体（南京金斯瑞生物科技有限公司）。……