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猪圆环病毒病的研究进展

2021-12-04许亚改武瑞栓化世鹏

畜牧业环境 2021年9期
关键词:圆环病猪仔猪

许亚改,武瑞栓,张 涛,化世鹏

(1.石家庄市动物疫病预防控制中心,河北石家庄 050030;2.石家庄市平山县裕农养殖有限公司,河北石家庄 050030)

1 前言

我国猪病较为复杂,除新病、外来病外,一些免疫抑制病引起的继发感染对养猪业也是一个重大威胁,其中圆环病毒病就是此类疾病的代表之一。1991年,PCV2首次在加拿大报道。郎洪武等在2000年首次提出PCV2在我国流行。经过这些年的研究,人们对圆环病毒的认识不断更新。本文对其研究进展进行简单概括,为有效防控此病提供参考。

2 病原学

猪圆环病毒是世界上迄今为止已知的最小的一种无囊膜的单股环状DNA病毒。其直径约12~23nm,呈二十面体对称,因其DNA呈环状,故命名为圆环病毒。2016年以前根据抗原性和基因型的不同分PCV1和PCV2。2016年,美国PaLinski等从病猪的病理织中检测出一种新型圆环病毒—猪圆环病毒3型,2017年,我国首次报道了PCV3。2019年,湖南大学生物学院兽禽病毒学研究组发现了一种新型猪圆环病毒(暂命名PCV4)。PCV1无致病性,PCV2、PCV3有致病性,PCV4致病性尚未明确。我国流行范围最广的PCV2毒株为PCV2b。PCV病毒因其无囊膜,也称裸病毒。目前,已知的猪圆环病毒、口蹄疫病毒、猪细小病毒和猪水疱病病毒均属于裸病毒。这类病毒对外界的抵抗力较强,对热具有一定的耐受力,对苯酚、氧化剂、氢氧化钠和季胺类化合物等比较敏感。不具血凝性,不凝集牛、羊、猪、鸡等多种动物和人的红细胞。

3 流行病学

猪圆环病毒在自然界中广泛存在,其自然宿主是家猪和野猪,各年龄段的猪均易感,仔猪感染后发病严重,6~12周龄猪多见。病猪和带毒猪(多数为隐性感染)为本病主要传染源。病猪所接触的物品(饲料、饮水、垫料、运输工具等)、病猪分泌物(尿液、粪便等)也可能带有病原。

PCV可经口腔、呼吸道感染猪,种公猪和怀孕母猪通过精液和胎盘感染胎儿。有研究表明,PCV2通过初乳可以垂直传播给哺乳仔猪[3]。近几年也有母猪初乳中含有PCV3型的相关研究。

4 致病机理

圆环病毒2型的致病机理一直研究的热点问题,研究相对比较成熟,这里我们对其进行阐述,主要观点有以下三种。一是靶细胞机制。PCV2感染的靶细胞主要是单核/巨噬细胞系。有研究表明,PCV2的靶细胞在胎儿期是心肌细胞、肝细胞和巨噬细胞。对新生仔猪来说,巨噬细胞是其唯一的感染细胞。二是免疫抑制机制。PMWS病猪表现为严重的淋巴组织损伤,包括淋巴细胞缺失和淋巴组织的巨噬细胞浸润等。PCV-2可能依赖自身和其它未知辅助因子的免疫调节活性诱导淋巴细胞凋亡和抑制细胞因子的产生,引起机体免疫抑制。三是应激及其他因素响。PCV2虽然是致病因素,但不是充分条件,必须在其他因素参与下才导致明显临床症状。这些因素主要有饲养管理不善、应激等。动物机体受外界刺激产生应激时,免疫系统机能亢进,免疫细胞分裂增殖活性增强,导致PCV-2大量增殖而致病。如断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的发生,多由于现代规模化养猪场过度追求生产效率以及经济效益,对哺乳仔猪实行早期断奶产生强烈应激,加之其免疫系统功能及消化系统不完善、母源抗体水平低下等因素综合作用下,使仔猪易暴发PMWS。在生产中,猪圆环病毒还常与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒混合感染,导致猪发生严重的临床症状。

5 临诊症状

5.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)

该病主要侵袭哺乳期和保育期仔猪,尤其是6~18周龄仔猪最易感。病猪出现呼吸急促或困难、腹泻、贫血、进行性消瘦等特征。该病严重影响猪的生长发育,耐过后多变为僵猪。发病率和死亡率随饲养条件、爆发的阶段不同而不同。剖检可见淋巴结异常肿大、肝硬变、脾萎缩、肺有时扩张、肾皮质表面会出现白点,许多组织中可见局灶性淋巴组织细胞浸润。

5.2 猪皮炎肾病综合征(PDNS)

该病被认为是一种免疫介导的水疱性病,主要影响皮肤和肾。常发生于保育阶段结束进入生长阶段的猪群。临床症状主要为皮肤发生近似圆形的紫色丘疹,与周围健康皮肤界限清楚。会阴部、四肢、胸腹部较早出现,有时可扩展到耳朵等处皮肤。如无继发感染,死亡率较低。剖检可见肾肿大、皮质有密集白色坏死灶,使肾外观呈花斑状。

5.3 新生仔猪先天性震颤

先天性震颤主要发生于刚出生不久的仔猪,表现全身肌肉震颤,头部尤为明显,无其他明显变化。本病只通过母猪垂直传给仔猪,仔猪之间不水平传播。症状轻微者数小时或数日自愈,重症者病程可持续数周,若能吃到母乳的仔猪,一般预后良好,有的病猪因吃不到母乳或受挤压而死。脑组织无特征性病变,仅利用免疫组化技术发现病毒阳性信号。

5.4 繁殖障碍

母猪无明显临床症状,在不同妊娠阶段发生流产、死胎等。解剖流产和死胎,呈现肝充血和心脏肥大、心肌变色。从流产胎儿中检测出圆环病毒2型,可作出诊断。

5.5 肺炎

病猪表现呼吸困难,肺脏点状出血。猪圆环病毒2型与肺炎支原体、蓝耳病毒、流感病毒等组成了呼吸道疾病综合征的主要病原。

5.6 肠炎

有报道在发生腹泻的猪肠粘膜中,用免疫组化技术发现了病毒信号,用PCR方法从粪便中检测出病毒,病变主要是肉芽肿肠炎。

6 诊断

根据病猪腹股沟淋巴结肿大,脾、肾肿大,肝萎缩,渐进性消瘦等临床症状和病理变化可做出初步诊断,但要确诊,需应用实验室方法。常用诊断方法有以下几种:

6.1 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)

聚合酶链式反应检测是一种快速、特异性强的诊断方法,可以直接检测到病毒核酸,是兽医临床最常用的分子生物学实验技术。

6.2 原位杂交技术(in situ hybridization)

原位杂交技术检测灵敏度较高,能够精确定位PCV2病毒的DNA在细胞中的位置,可用于检测临诊病料和病理分析。

6.3 酶联免疫吸附实验(ELlSA)

ELISA方法适合大规模检测,可用于检测血清中的病毒抗体。对实验条件和人员要求不高,在兽医临床诊断中广泛应用。

6.4 间接免疫荧光法(llF)

此方法适宜检测细胞培养物中的PCV。用组织病料以盖玻片在PK-15细胞培养后进行检测,也可对PCV进行分型。

6.5 电镜观察

利用电镜,依据病毒自身形态结构等不同特征,能很快做出诊断。Steveson GW等在透射电镜下观察感染PCV2的PK-15细胞,首次发现了PCV的包涵体。

7 防治

7.1 疫苗

目前灭活疫苗较为成熟,具有无毒、无害、效果稳定的优势。国内主要有LG株、SH株、DBN-SX07株、WH株及ZJ/c株。毒株间遗传差异不大,仅是分离地点不同而已,这5个毒株均属于PCV-2b。关于PCV2的弱毒疫苗的相关研究类报道较少。有人将PCV2的ORF2克隆到缺失ORF2的PCV1的骨架中,得到 PCV1-2嵌合型病毒。研究表明,该嵌合型病毒是减毒的,能刺激机体产生特异性免疫反应,且毒力不易返强,可作为制备PCV弱毒疫苗的优势毒株。亚单位疫苗方面,Cap蛋白是ORF2编码的PCV-2的主要结构蛋白,其能刺激动物机体产生针对PCV-2的特异性免疫应,是国产猪圆环疫苗重点研发方向。同时,由于PCV-2可与多种疾病发生混合感染,PCV-2与其他疾病的联合疫苗的研发成为研究的热点。已有多家机构进行了猪圆环病毒2型与猪细小病毒二联灭活疫苗、猪圆环病毒2型与副猪嗜血杆菌二联灭活疫苗、圆环病毒2型、副猪嗜血杆菌和与猪肺炎支原体三联灭活疫苗研究。

7.2 综合防控措施

对PCV的防控,要重点做好以下几方面。一要加强生物安全管理。坚持自繁自养和实行全进全出,保持环境卫生。人员、车辆、猪只运输用具等要执行严格的消毒标准。做好引种防疫工作,及时隔离、淘汰病猪。二要加强饲养管理。猪场分区布局合理,猪舍保持良好通风,饲养密度适中,避免将不同日龄的猪混群饲养。减少各种应激因素,特别是减少对断奶仔猪的应急。保障仔猪及时、充分获得初乳,避免过早断奶和换料,给予优质全价饲料。三要做好免疫预防。圆环病毒疫苗免疫主要有两种方法:一种是免疫怀孕母猪,使母源抗体通过哺乳传递给仔猪。二是免疫仔猪,在新生仔猪感染该病毒前进行免疫接种,诱导其产生相应抗体。同时做好猪瘟、猪细小病毒病、猪支原体肺炎等疫苗的免疫接种,预防和控制其他感染性疾病。

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