郑荣儿,吴佳敏,张瑞娟,姬金亮,李雅彬,俞晓平,许益鹏

(中国计量大学 生命科学学院 浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室,浙江 杭州 310018)

褐飞虱Nilaparvatalugens(Stål)(Hemiptera: Delphacidae),是一种在我国和东南亚地区的农业害虫之一,以水稻韧皮部为食,爆发时会对水稻造成巨大的危害,在农业上防治较为困难[1]。目前,基于基因功能的研究,利用RNA干扰等分子生物学技术防治褐飞虱已经成为一种新兴的防治方法[2]。PIGM,编码糖基磷脂酰肌醇(GPI)甘露糖基转移酶I,在GPI锚蛋白的生物合成途径中负责将第一个甘露糖从多利醇-磷酸-甘露糖转移到内质网网腔侧的前体上,对于GPI锚蛋白的合成具有至关重要的作用[3]。PIGM亚纯启动子的突变将阻断GPI的转录,从而导致遗传性糖基磷脂酰肌醇的缺乏,引起静脉血栓的形成和癫痫的发作[4]。目前,关于PIGM的研究都集中在哺乳动物或原生动物中,在昆虫中未见相关的报道。我们前期发现,褐飞虱PIGM(NlPIGM)在卵巢中特异性高表达,并通过功能研究证明NlPIGM在褐飞虱的生殖发育中具有重要的调控作用,RNA干扰NlPIGM的表达会导致褐飞虱雌成虫卵巢发育延滞、产卵量下降、胚胎发育畸形,但其具体的作用机制不明。因此,进一步研究PIGM在褐飞虱中的作用机制对于利用PIGM作为褐飞虱防治靶标有着重要意义。

酵母双杂交是一种在筛选潜在互作蛋白和研究蛋白之间相互作用方面被广泛应用的生物技术。Chi等[5]构建了烟粉虱Bemisiatabaci的cDNA文库并从中筛选了54个可能与棉花曲叶病毒外壳蛋白……