张玲玲 余 莉 李长红 苗 亮 陈 炯

香鱼()CC型趋化因子受体3(CCR3)基因的分子鉴定及其对鳗弧菌感染响应的研究*

张玲玲1, 2余 莉2李长红1, 2①苗 亮1, 2陈 炯1, 2①

(1. 宁波大学 农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室 宁波 315211; 2. 宁波大学海洋学院生物化学与分子生物学实验室 宁波 315832)

CC趋化因子受体3 (CCR3)是CC型趋化因子的受体, 属于G蛋白耦联受体(GPCRs)家族成员, 与过敏等多种炎性疾病密切相关。为探讨香鱼CCR3 (PaCCR3)在响应鳗弧菌感染时的表达变化, 从转录组测序数据中获得了PaCCR3基因全长cDNA序列。序列分析表明, PaCCR3具有7次跨膜结构, 与胡瓜鱼CCR3氨基酸序列同源性最高(84.6%)。系统进化树分析表明, 哺乳类、两栖类和鱼类CCR3单独成簇, 鱼类CCR3形成一个大簇; PaCCR3与胡瓜鱼CCR3进化相关性最高。实时荧光定量PCR结果显示, PaCCR3基因mRNA在单核/巨噬细胞(MO/MФ)中表达量最高; 鳗弧菌感染后肝、脾和头肾中PaCCR3基因mRNA表达量显著上调; 且香鱼MO/MФ经鳗弧菌体外刺激后, PaCCR3基因mRNA的表达量显著上调。Western blot分析表明经鳗弧菌体外刺激后, 香鱼MO/MФ中PaCCR3蛋白的表达量也显著增加。综上, PaCCR3基因mRNA及其编码蛋白响应于病原体感染而被诱导表达。研究结果首次揭示了香鱼CCR3基因mRNA及蛋白的表达响应于鳗弧菌侵染, 它可能通过介导MO/MФ的功能活性参与免疫应答, 可为深入探究鱼类CCR3的功能及作用机制提供新的切入点。

香鱼(); CCR3; 单核/巨噬细胞; 鳗弧菌; 表达分析

CC型趋化因子受体3 (CC chemokine receptor 3, CCR3)是CC型趋化因子的受体, 属于G蛋白耦联受体(G protein-coupled receptor, GPCR)家族成员。最早研究发现, CCR3选择性地在人嗜酸性粒细胞上表达, 并且嗜酸细胞活化趋化因子(eotaxin)是CCR3高特异性的拮抗剂(Kitaura, 1996)。……