万娟

（贵州大学动物科学学院，贵州贵阳550025）

伪狂犬病(porcine pseudorabies, PR)又称奥耶斯基病，是由伪狂犬病毒（pseudorabies virus，PRV）引起的可以导致猪、牛、羊等多种动物死亡的一种急性、热性、高度接触性传染病。其临床症状为体温升高、全身瘙痒、多器官功能衰竭、瘫痪等。虽然PRV 可以感染多种动物，但是猪是其唯一的自然贮存宿主。几乎所有阶段的猪都可感染该病毒，该病严重危害我国养猪业的发展，国际动物卫生组织已将其列为法定报告传染病。

2011 年起我国各地开始陆续在传统疫苗免疫的猪场暴发PRV，说明PRV 开始出现了变异，而传统疫苗对于变异株不能起到良好的免疫保护作用。在2018 年报道了一例关于PRV 感染人的事件说明了该病毒已经具有感染人类的能力，能够及时诊断出PRV 是控制PR 的前提。病毒分离鉴定是实验室诊断中最经典可靠的诊断方法，但该方法过于繁琐并且诊断所需时间过长不能满足生产实际需求。在分子生物学方法方面，人们建立了q-PCR，减少了检测所需时间，为了基层检测需要，建立了不需要特殊仪器设备的环介导等温核酸扩增技术，近几年，随着纳米PCR 方法的出现，人们又建立PRV 纳米PCR 检测方法显著提高了反应灵敏度，PCR-LFD 技术将PCR 与横向流动试纸条、核酸探针相结合，不仅增加了其特异性还消除了电泳对环境造成的污染。本文从PRV 的分子生物学检测方法进行综述，以期为临床快速诊断PRV 所用方法的选择提供一定的依据。

1 分子生物学检测方法

1.1 荧光定量PCR

荧光定量PCR 在常规PCR 基础上引入了荧光探针，从而提高特异性和敏感性，并且不需要进行凝胶电泳从而降低了开盖点样时的污染，可直接通过电脑观察到实时结果大大降低检测所需时间，在2 个小时左右就可以完成。……