1986年 鸡冠提取

公鸡冠透明质酸的制备及其理化性质 沈渤红 张天民

摘要：选用我国尚未开发的动物资源公鸡冠为原料，设计了适于生产的制备工艺，并对所得产品进行了理化分析，为透明质酸制剂的生产提供了实验依据。

结论：为了保持透明质酸的大分子特性，采用了一次蛋白酶解、Sevag技术与CPC分级沉淀技术配合使用，有效地除去了蛋白质和核酸。实验中发现：在高盐浓度下，大部分蛋白质遇到有机溶剂可变性，或被盐析沉出，或在乙醇沉淀之后不再溶于水，这一步可明显地使提取液得到纯化。根据多糖与蛋白质的CPC复合物解离临界盐浓度不同的这一原理，我们进一步采用CPC分级沉淀，以除去剩余蛋白质与核酸。

实验中观察到，乙醇沉淀透明质酸水提液时，出现两种形式的沉淀，主要部分为纤维状，漂浮于上部，另一部分为粉末状，沉于下部。当在强酸条件下，用氯仿处理提取液后，再沉淀时，纤维状沉淀消失，溶液黏度明显降低，说明纤维状沉淀与大分子特性和溶液浓度有关。透明质酸溶液浓度在低于0.05%时，其分子在溶液中大多独立存在;当浓度大于0.1%时，部分交织成网状结构。推测这种网状结构物质沉淀下来呈现纤维状，而部分散的分子沉淀下来呈粉末状。

从保持其高分子量、高黏度和高纯度等方面进行了理化分析，结果表明：经换算，本工艺制备的鸡冠透明质酸的分子量接近Healon（眼用黏弹剂），并具有高黏度及高纯度特性，可用于配制透明质酸制剂。……