赵云飞 徐祖伟 黄耿 桂定文 姜卫东 付金伦 彭伟 万京桦鄂东医疗集团黄石市中心医院（湖北理工学院附属医院）泌尿外科 45000；肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室，黄石 45000；武汉科技大学职业危害识别与控制湖北省重点实验室 40065

肾癌是世界范围内最常见的泌尿系统肿瘤之一，发病率及病死率呈逐年升高［1］。基因治疗是肾癌研究的新方向。环状RNA（circRNA）是一类保守的小分子序列，呈闭环结构，能够有效调控基因的表达，导致细胞生物学行为发生变化［2］。肾癌与circRNA的异常表达直接相关，circRNA在肾癌的发生和发展中产生重要影响［3］。目前仅有少部分circRNA在肾癌中的作用得到了证实，使得以circRNA为靶点的靶向治疗成为了肾癌研究者共同关注的重点［4］。circ-BTG2是一种新发现的circRNA，circ-BTG2在肾癌中的作用及机制并不清楚。本研究通过实验研究下调circ-BTG2对肾癌细胞生物学性状的影响及具体机制。

1 材料与方法

1.1 细胞与主要试剂 肾癌786-O细胞株购于上海中科院细胞库；实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）相关试剂盒购于日本TaKaRa公司；circ-BTG2抑制剂（GATAACAGGGTAACGCTGTCT）和无义对照序列由广州市锐博生物科技有限公司合成；转染试剂Lipofectamine RNAiMAX购于美国Invitrogen公司；Transwell小室购自美国Corning公司；一抗购于美国BD公司；四甲基偶氮唑蓝（MTT）试剂盒和二甲基亚砜购自武汉博士德生物技术有限公司。

1.2 细胞培养和分组 786-O细胞培养在含10%胎牛血清（FBS）的RPMI 1640培养基，培养条件为5%CO2、37℃。将对数生长期786-O细胞接种至24孔板，依据Lipofectamine RNAiMAX的说明将无义对照序列和circ-BTG2抑制剂转染，命名为对照组和实验组。……