miR-3679-5p通过抑制FOXM 1表达对食管癌KYSE30细胞增殖和凋亡的影响
2021-11-22雷蕾何小俊李薇薇王宝英郑安锐黄耿鄂东医疗集团黄石市中心医院湖北理工学院附属医院消化内科45000武汉大学湖北省人民医院武汉40060鄂东医疗集团黄石市中心医院湖北理工学院附属医院泌尿外科45000
雷蕾 何小俊 李薇薇 王宝英 郑安锐 黄耿鄂东医疗集团黄石市中心医院(湖北理工学院附属医院)消化内科 45000;武汉大学湖北省人民医院,武汉 40060;鄂东医疗集团黄石市中心医院(湖北理工学院附属医院)泌尿外科 45000
食管癌是全球常见的消化系统恶性肿瘤,呈明显的地域性分布[1]。食管癌早期的症状如异物感容易被患者忽略,进展为晚期后多数患者失去手术机会,5年生存率不到20%[2]。因此,探究食管癌发生和发展的分子机制具有重要临床意义。研究显示,在细胞内存在众多微小RNA(miRNA),miRNA通过抑制或者直接降解靶基因信使RNA(mRNA)表达,影响靶基因的表达,调节细胞的分化、发育、增殖及凋亡等细胞活动[3-5]。miRNA的异常表达与食管癌细胞的放疗敏感性、细胞活力密切相关[6]。研究证实,miR-3679-5p在结直肠癌细胞中发挥抑癌基因作用[7]。关于miR-3679-5p在食管癌细胞中的作用研究尚未见报道。本研究旨在探讨miR-3679-5p对食管癌细胞增殖和凋亡中的影响及可能的分子机制。
1 资料与方法
1.1 材料和试剂 食管癌细胞KYSE30购自中国科学院上海细胞库;RPMI-1640培养基、胎牛血清(FBS)购自美国Hyclone公司;阴性对照模拟物和miR-3679-5p模拟物均由北京天根生化科技有限公司设计并合成;荧光实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)试剂盒和引物购自大连宝生物工程有限公司;Lipofectamine®RNAiMAX转染试剂购自美国Invitrogen公司;Trizol试剂盒和双染流式细胞术试剂盒购自武汉默沙克生物科技有限公司;一抗CDK1、Bcl-2、Bcl-w、β-actin、叉头框蛋白M1(forkhead box protein M1,FOXM1)购自美国BD公司。
1.2 细胞培养和转染 在37℃、5%CO2条件下,KYSE30细胞采用含10%FBS的RPMI-1640培养基培养。……
