章建瀛 王清水 钟雯婷 林幼玉

【摘要】基因组编辑技术是帮助治疗方法最具挑战性但最有效的工具之一。Crispr可以提高基因编辑的效率，并尽量减少脱靶率。定期排列的短回文重复序列（CRISPR）相关蛋白（Cas9）是一种革命性的基因组编辑技术。CRISPR/Cas9在多种疾病中的新应用已经证明了它的有效性，并已应用于体外体细胞和多能干细胞的模型，以及体内动物模型，最终可能被用来纠正有缺陷的基因。本综述的重点是CRISPR/Cas9的最近应用及其对治疗具有挑战性的人类疾病的贡献，例如各种类型的癌症、神经退行性疾病和广泛的其他疾病。CRISPR技术是一种新的疾病治疗方法，提高了药物的有效性，促进了个性化医学的发展。

【关键词】CRISPR，Cas9，基因编辑，基因治疗，人类疾病

【中图分类号】R-3 【文献标识码】A 【文章编号】2026-5328（2021）08-104-03

English abstract：Genome editing techniques are considered to be one of the most challenging yet efficient tools for assisting therapeutic approaches. Several studies have focused on the development of novel methods to improve the efficiency of gene editing，as well as minimise their off-target effects.The focus of the present review was the recent applications of CRISPR/Cas9 and its contribution to the treatment of challenging human diseases，such as various types of cancer，neurodegenerative diseases and a broad spectrum of other disorders. CRISPR technology is a novel method for disease treatment，enhancing the effectiveness of drugs and improving the development of personalised medicine.

Keywords：CRISPR，cas9，gene editing，gene therapy，human diseases

細菌和古细菌在长期演化过程中，形成的一种获得性免疫防御体系，即CRISPR/Cas9，可用来对抗入侵的病毒及外源DNA。crRNA与 tracrRNA可以通过碱基配对形成复合体，这种复合体可以介导核酸内切酶酶 Cas9蛋白在特定位点剪切双链DNA，而人为去设计这两种RNA可以介导对 DNA 双链进行定点切割、DNA 序列的敲除、插入、定点突变以及组合编辑[1]。

II型CRISPR-Cas系统相比于I型和III型，结构比较简单，执行生物功能的部分仅由Cas9和tracrRNA：crRNA两个部分组成，而且操作更加简便。之前的研究曾将tracrRNA和crRNA分别表达形成双引导RNA系统，但这种系统容易引起非同源重组介导插入缺失的错误修复，但后来发现将crRNA与tracrRNA编辑合成单一的RNA嵌合体，也可以指导Cas进行切割[2]。……