miR-372靶向LATS2对结肠癌SW620细胞增殖、迁移侵袭的影响*
2021-11-13姚春和
姚春和,张 荣
(陕西省延安大学咸阳医院 1.普通外科一病区 2.消化内科二病区,咸阳 712000)
结肠癌是我国常见的高发性消化系统恶性肿瘤,近年来其发病率和死亡率均有明显攀高趋势[1]。结肠癌中存在着许多异常表达的微小RNAs(microRNAs,miRNAs),而这些miRNAs 可通过调控多种靶基因影响细胞增殖、侵袭和迁移等生物学功能[2-4]。已有研究证实,miR-372 在结肠癌组织和血液中高表达,与肿瘤大小和肿瘤结节转移有关,且与大肿瘤抑制同系物2(large tumor suppressor homolog 2,LATS2)之间存在负相关关系[5-6];而LATS2在结肠癌恶性进展中发挥着重要的抑制作用[7]。有研究指出,miR-372 可通过靶向调控LATS2 表达促进乳腺癌细胞增殖,而抑制miR-372 表达可通过调控LATS2 表达抑制前列腺癌细胞增殖和迁移[8-9]。猜测miR-372可能通过靶向调控LATS2促进结肠癌恶性进展。因此,本研究以人结肠癌SW620细胞为研究对象,通过观察miR-372 与LATS2 的靶向关系,探讨miR-372靶向调控LATS2对SW620细胞增殖、侵袭和迁移的影响,旨在阐明miR-372在结肠癌中的作用及其机制。
1 材料与方法
1.1 主要试剂与仪器 人结肠癌细胞株SW620 购于美国ATCC,miR-372模拟物及其阴性对照购于广州锐博生物。脂质体2000 和PVDF 膜购于美国Invitrogen 公司,MTT 试剂、青霉素-链霉素溶液(100×)、ECL 显色液、辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG、BCA 定量试剂盒和荧光素酶试剂盒购于碧云天生物技术有限公司,二甲基亚砜购于南京凯基生物公司。PrimeScript™反转录试剂盒和SYBR Premix Ex Taq 试剂盒购于TaKaRa 公司,Transwell小室购于美国BD Bioscience 公司,CO2培养箱购于美国Thermo Scientific 公司,pLV-LATS2 慢病毒载体质粒购于上海吉凯基因化学技术公司,兔抗人LATS2抗体购于英国Abcam公司,兔抗人β-actin抗体购于武汉博士德公司。……
