段利利，张 婵，李志斌，杨 红，王 林△，赵依芳

（空军军医大学第一附属医院 1.妇产科；2.门诊部，西安 710032；3.西北妇女儿童医院妇产科，西安 710003）

宫颈癌是全球女性第二大常见妇科癌症[1]，准确诊断是预防宫颈癌的第一步。传统宫颈巴氏涂片及液积细胞学筛查已经大大降低了宫颈癌的发病率，但其重复性和敏感性有限[2]。近红外荧光（NIRF）成像作为一种新的癌症检测手段，在癌症病理信息获取方面表现出巨大潜力[3-5]，但该技术所要求的近红外荧光探针需具备优良的光学特性、合适的生物相容性和肿瘤靶向能力[6]。IR-783菁染料能够选择性地聚集在肿瘤部位，是一种理想的近红外荧光探针[7]。为了探索IR-783在宫颈癌中的临床应用价值，本研究观察不同环境下癌细胞对IR-783菁染料的摄取，并探讨癌细胞中有机阴离子转运肽差异表达的潜在机制，为宫颈癌的诊断方法提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 IR-783 染料 IR-783 染料购自美国Sigma-Aldrich 公司（#115970-66-6），溶于稀释的二甲基亚砜（DMSO），经0.2 μm 过滤器过滤后保存在4 ℃冰箱中待用。

1.2 细胞培养 人宫颈癌细胞系HeLa、SiHa 和Caski和人正常永生化宫颈上皮细胞（H8）均购自中科院典型培养物保藏委员会细胞库（上海），采用含5%胎牛血清、青—霉素/链霉素的DMEM 培养液并置于37 ℃、5%CO2的细胞培养箱中培养[8]。

1.3 细胞摄取IR-783染料 以细胞接种于涂有vitronectin（Na-lgenNunc）的四腔玻片上，在含有5%胎牛血清的培养基中培养24 h。除去培养基后，将载玻片在37 ℃下的IR-783染料（20µm）的工作溶液中培养30 min，PBS 清洗两次；4%多聚甲醛固定10 min，PBS清洗，用玻璃盖玻片覆盖载玻片和水性安装介质（Sigma-Aldrich）。……