国家重点研发计划“食品风险组分毒理学通路鉴别确证技术研究(2017YFC1601702)”进展
2021-11-12
安全 2021年12期
关键词:实验
针对用传统的毒理学方法进行毒性物质职业健康安全性风险评估存在耗时费力和食品风险组分毒性预测困难的问题,本研究开展食品风险组分毒理学通路鉴别确证技术方面的研究。
1 研究目的
使用遗传通路对新型潜在食品风险化合物的遗传毒性进行筛选和确证,为食品非法添加物对职业健康的危害预防提供信息和技术支撑。
2 研究方法
(1)构效关系分析初筛。研究针对2010年国家卫健委公布的食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品非法添加物品种名单(共6批),共126种食品添加物。本次研究使用的工具为Toxtree(version2.6.13),通过输入各种受试物的原型编码或化学结构,以决策树的形式,根据结构警示对物质的遗传毒性进行分类和预测。
(2)脱细胞彗星实验模型。该模型的制备过程如下:
制片:从SD大鼠眼眶取约1.5ml静脉血,制备脱细胞核DNA板。
染毒与漂洗:以细胞裂解液作为染毒缓冲液。按受试物溶液分为高、中、低3个剂量组,以高剂量组为基准,以2倍倍比关系稀释为中、低剂量组,将纯水和相同细胞裂解液作为对照组。
解旋与电泳:在碱性电泳液避光解旋30min。调节电压25V,电流300mA,在碱性电泳液电泳,室温30min。
漂洗:用纯水漂洗,清洗中和电泳液,洗去过多的盐(2次,5min/次)。
染色:滴加Gelred荧光染料染色,彗星光学显微镜下观察损伤,然后用专业软件(CometA1.0)定量分析尾部DNA百分比。该模型与单纯脱细胞彗星试验相比,采样简便,省时省力。
(3)细胞彗星实验。选用繁殖能力强的悬浮细胞YAC-1小鼠淋巴瘤细胞。……
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