祁琴,童小雨,吴璐一,吴楚婷,赵继梦,黄艳,李昆珊,马晓芃,王照钦,冯异,吴焕淦

·动物实验·

透明化三维成像研究艾灸对结肠炎大鼠肠道血管生成的作用

祁琴1,童小雨2,吴璐一1,吴楚婷3,赵继梦3,黄艳1,李昆珊3,马晓芃3,王照钦1,冯异2,吴焕淦3

(1.上海中医药大学针灸免疫效应重点研究室,上海 200030;2.复旦大学基础医学院中西医结合学系,医学神经生物学国家重点实验室,复旦大学中西医结合研究院,上海 200032;3.上海市针灸经络研究所,上海 200030)

应用组织透明化技术观察隔药灸对2-4-6三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的实验性结肠炎大鼠肠道血管生成的影响,从三维水平探讨隔药灸治疗结肠炎的潜在机制。采用TNBS灌肠法制备结肠炎大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组和抑制剂组,每组8只。隔药灸组采用隔药灸天枢、气海穴治疗;抑制剂组采用10 mg/mL的血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)抑制剂溶液按1 mL/kg体质量进行腹腔注射治疗。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组结肠组织病理学改变;采用CUBIC组织透明化技术对各组大鼠结肠组织进行透明化处理,通过血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM-1/CD31)染色标记血小板内皮细胞,采用Imaris三维图像处理软件对结肠血管网络进行三维测量和分析。HE染色结果显示,模型组大鼠结肠形态结构紊乱,黏膜固有层有明显裂隙样溃疡,并有大量炎性细胞浸润;隔药灸组和抑制剂组上述病理改变均减轻,可见新生的黏膜上皮修复。结肠血管网络三维测量和分析……