黎昌江，陈方安，洪娟，李秋慧

(琼海市人民医院 眼科，海南 琼海 571400)

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)是一种常见的但是可预防的糖尿病微血管并发症，是全球失明或严重视力丧失的主要原因[1]。眼后视网膜内皮细胞结构和功能的改变是DR慢性进程的重要起始点，然而，其中涉及的细节机制尚未完全弄清[2]。因此，仍然迫切需要阐明调节高糖引起的氧化应激和炎症的分子机制。微小RNA(miRNAs)广泛存在于真核细胞中，是一组参与调控众多生物学过程的精细调节器，包括细胞增殖、分化、凋亡、氧化应激损伤等[3]。链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)诱导的糖尿病大鼠模型视网膜组织中存在大量差异性表达的miRNAs[4]。miR-155作为miRNAs家族的重要成员之一，Gao等[5]证实高糖处理后的人内皮祖细胞中其表达上调，进而促进高糖诱导的细胞凋亡以及氧化应激损伤。本研究以高糖作用下视网膜血管内皮细胞为模型，拟探讨miR-155对视网膜血管内皮细胞损伤的影响及其机制，进而为DR的治疗提供一种潜在的新的治疗靶点。

A. CCK-8法检测高糖对HRECs存活率的影响；B. RT-qPCR法检测高糖对HERCs miR-155表达的影响(与0 mmol·L-1D-葡萄糖组相比，a P<0.001)

1 材料和方法

1.1 细胞

人视网膜血管内皮细胞(HRECs)购自美国Sciencell 实验室。

1.2 主要试剂及仪器

L-DMEM培养基购自美国Gibco公司；RNA提取试剂盒购自北京天根生化科技有限公司；蛋白定量试剂盒购自美国Pierce公司；Annexin V-FITC/PI 流式细胞检测试剂盒购自美国BD公司； CCK-8 试剂盒、活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)检测试剂盒、丙二醛(malondialdehyde，MDA)检测试剂盒、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)检测试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)检测试剂盒和蛋白定量试剂盒均购自南京建成生物研究所；……