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采用熔解曲线法进行RHD c.1227G>A基因检测研究

2021-11-05刘太香

南京医科大学学报(自然科学版) 2021年10期
关键词:检测方法

马 玲,刘太香,薛 敏

江苏省血液中心输血研究室,江苏 南京 210042

Rh 血型系统因其复杂多态性及临床重要性而备受关注,其中RhD抗原免疫原性最强,相应的抗D是导致胎儿新生儿严重溶血的最主要抗体,因而RhD 阴性孕妇妊娠及血液安全管理需格外重视[1]。RhD 抗原存在诸多的变异型,根据红细胞膜上D 抗原表达的数目和性质,大致可分为弱D、部分D以及东亚人群常见的Del型等。各种RhD变异型基因背景机制不一,免疫原性也不相同,尤其是Del表型的检测及个体RhD 抗原免疫应答情况值得重视。Del表型最初由Okubo等[2]报道,其D抗原表达非常弱,每个红细胞膜上D抗原拷贝数低于200个[3],常规血清学检测不出,需要通过吸收放散技术才能检测到。有调查发现东亚人群中初筛为RhD 阴性者中17%~30%为Del 型,其中约98%的分子遗传背景为RHD 基 因exon 9 c.1227G>A 同义突变(RHD*01EL.01)[4],因此该型又被称为亚洲型DEL 血型(Asia type DEL 血型)。有研究报道在亚洲型DEL孕妇中,均未发现抗D抗体产生,因此提议,Del型孕妇可以免去孕期频繁的抗体筛查和抗D免疫球蛋白注射[5-6],这一理论如果获得推广应用无疑有良好的社会效益。因而,研究第一步,建立RHD c.1227G>A基因位点高效、便捷的检测方法十分必要。

常规Del表型的血清学检测是通过吸收放散的方法,该操作步骤较繁琐,对检测人员的手法和经验有一定要求,易导致差错。随着DEL型分子机制的阐明,血型基因检测方法的发展为DEL型鉴定提供了新的技术手段。本研究旨在建立用于检测RHD c.1227G>A 基因分型的熔解曲线分析法,该方法基于单……

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