刘 静，孔祥清

南京医科大学第一附属医院心血管内科，江苏 南京 210029

钙化性主动脉瓣膜疾病（calcific aortic valve dis⁃ease，CAVD）是一种常见的心脏疾病。在65岁以上的成年人中，CAVD 导致心血管疾病的死亡率增加了大约30%；在75 岁以上的成年人中，死亡率增加了40%～50%［1-2］。该疾病的发展被认为是由内皮损伤、脂质沉积、炎性细胞浸润、细胞外基质（extracel⁃lular matrix，ECM）沉积和瓣膜新血管形成引起的，从而促进成骨和钙化［3］。迄今为止，尚无有效的药物可以治疗或者延缓CAVD的进展。华法林是维生素K 的拮抗剂，一直是抗凝治疗的主要药物［4］。华法林一方面通过抑制肝脏中的维生素K环氧还原酶发挥抑制凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ的合成，从而起到抗凝血的作用；另一方面，华法林还可以抑制维生素K 依赖蛋白基质Gla 蛋白（matrix Gla protein，MGP）的羧基化。羧基化MGP通过直接抑制骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）2 和BMP4 的形成来防止钙化，是组织细胞钙化的重要抑制因子［5-6］。我们的前期研究已证实，治疗水平10 μmol/L的华法林和1.6 mmol/L的无机磷酸盐（Pi）可导致主动脉瓣间质细胞（aortic valve interstitial cell，AVIC）的钙化［7-8］。

大量的动物实验和临床研究表明，银杏叶提取物（ginkgo biloba extract，EGB761）对心血管疾病具有保护作用，包括抗氧化清除超氧化物、自由基和一氧化氮（nitric oxide，NO），抗血小板，减轻炎症和动脉粥样硬化斑块形成，调节包括NO和内皮素（en⁃dothelin，ET）在内的血管活性物质的合成，从而保护血管［8］。最近有研究表明，EGB761可显著减少β⁃甘油磷酸钠诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞内钙的沉积，从而减轻血管钙化［10-11］，但尚不清楚EGB761是否可以减轻AVIC钙化。

因此，本研究主要在猪AVIC培养的基础上，以治疗水平10 μmol/L 的华法林和1.6 mmol/L Pi诱导钙化模型，观察EGB761对猪AVIC钙化及成骨分化的作用及其机制。……