儿童肺炎支原体感染的两种检测方法比较
2021-11-05周仁希林晓伟陈东周俊吴亦栋叶蓓
周仁希 林晓伟 陈东 周俊 吴亦栋 叶蓓
肺炎支原体(MP)是引起儿童呼吸道感染的常见病原微生物之一[1],在儿童呼吸道感染中约占30%。临床症状可从轻微的支气管炎到重症肺炎,严重感染可导致死亡,MP 也能引起多种呼吸道外并发症,其中属消化系统症状最常见。MP 感染在≥5 岁肺炎患儿中,其感染率可达50%[2],在因呼吸道感染的住院患儿中约>19.1%[3]。由于支原体肺炎(MPP)早期临床表现多样、影像学检查无显著特征,因此,实验室特异、快速检测MP 对儿童MP 感染临床诊断以及监测患儿预后具有重要的意义。本文通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测MP 抗体IgM 与实时荧光定量PCR 法(RT-PCR)检测MP 核酸的对照分析,探讨MP 感染的两种不同实验室检测方法在临床诊断中的价值。
1 资料与方法
1.1 临床资料 收集2018 年1 月至12 月杭州市儿童医院同时行肺炎支原体抗体IgM 检测及肺炎支原体核酸检测的6091 例住院患儿的临床资料,年龄22 天~15岁。患儿入院后,同时采集血清样本和咽拭子(或痰标本)各1 份及时做肺炎支原体抗体IgM 和核酸检测。
1.2 方法(1)仪器与试剂:抗肺炎支原体抗体IgM检测试剂盒购自欧盟医学诊断有限公司,肺炎支原体核酸检测试剂盒购自广州中山大学达安基因股份有限公司,ABI 7500 型实时荧光定量PCR 基因扩增仪(美国ABI 公司),HydroFlex 洗板机和Sunrise 酶标仪(Tecan公司)。(2)ELISA 检测:采用ELISA 原理,微孔板条上包被的肺炎支原体抗原可与稀释样本中的IgM 结合,加入酶标抗人IgM 抗体温育后加底物显色。具体检测方法严格根据使用说明书进行,每板设阴性对照3 孔,阳性对照2 孔和空白对照1 孔。设……
