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萝卜硫素对L- NAME诱导的人胎盘滋养细胞株HTR- 8/SV- neo氧化应激与凋亡的影响及其可能机制初探

2021-11-05程丽陈梅

东南大学学报(医学版) 2021年4期
关键词:检测模型

程丽,陈梅

(潜江市妇幼保健计划生育服务中心,湖北 潜江 433100)

妊娠期高血压疾病(hypertension disorder complicating pregnancy, HDCP)是孕妇所特有而常见疾病之一,其临床特点主要包括高血压、蛋白尿、水肿、昏迷以及心肾功能衰竭,严重时甚至引发死亡[1- 3]。HDCP病因和发病机制复杂,胎盘是母体与胎儿间进行物质交换的器官,胎盘滋养细胞功能异常会导致胎盘形成受阻,引发妊娠相关疾病[4- 5]。萝卜硫素(sulforaphane)是一种具有抗氧化损伤作用的活性物质,主要成分为异硫氰酸酯[6],能够预防各种类型的癌症,降低心血管疾病发生风险,并具有抗氧化、抗炎与免疫调节等作用[7- 9]。然而萝卜硫素在妊娠相关疾病,尤其是HDCP中的作用至今未见报道。已知N- 硝基- L- 精氨酸甲酯(L- nitro- arginine methyl ester,L- NAME) 作为一氧化氮合酶抑制剂可干预人胎盘滋养细胞,从而能够模拟HDCP微环境进行相关体外研究。本研究通过L- NAME干预HTR- 8/SVneo细胞模拟 HDCP微环境,观察萝卜硫素对HDCP胎盘滋养细胞氧化应激损伤、炎症反应及细胞凋亡的影响,初步探究其作用的信号通路,以期为HDCP的研究与诊治提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 主要材料与试剂

人胎盘滋养细胞株HTR- 8/SV- neo购自美国ATCC细胞库,萝卜硫素(纯度≥98%)购自杭州林格贝公司(批号20171106- 2),c- Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(JNK/p38 MAPK)信号通路阻断剂SB203580和L- NAME购自Sigma公司,胎牛血清、青霉素、链霉素及DMEM/F12培养基购自美国Gibco公司,细胞计数试剂盒- 8(CCK- 8)和Annexin V- FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒购自北京全式金生物科技公司,丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所,超氧化物歧……

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