猪盖他病毒IgG抗体间接ELISA检测方法的建立
2021-11-04夏银河王新卫李永涛史姿聪刘红英常洪涛王川庆
夏银河,周 峰,陈 陆,王新卫,李永涛,史姿聪,刘红英,常洪涛,杨 霞,王川庆
(河南农业大学动物医学院,郑州 450002)
盖他病毒(Getah virus,GETV)为单链正股RNA病毒,属于披膜病毒科甲病毒属成员,1955年由美国陆军医学研究部门从马来西亚的雪背库蚊(C.gelidus)中分离并命名,原型株为MM2021[1-2]。自发现以来,在欧洲、亚洲、大洋洲的不同动物中均发现GETV的存在,其传染性和致病性受到广泛关注;目前国内已在哺乳动物(猪、狐狸、马和牛)中分离到多株GETV毒株[3-6],且在商品化动物疫苗以及公猪精液中也有发现[4,7]。然而其在猪群中的流行态势和危害程度尚不明确,目前国内还没有针对该病毒的血清学诊断和调查的商品化的抗体检测试剂盒。因此建立一种特异有效、可用于大面积快速检测的ELISA检测方法对于该病毒的研究具有重要意义。
GETV病毒颗粒呈球形,有囊膜和纤突,直径约70 nm[8];基因组大小为11 000~12 000 bp,含有两个开放阅读框(open reading frame,ORF),编码4个非结构蛋白(NSP1、NSP2、NSP3、NSP4)和5个结构蛋白,包括Cap、E3、E2、6K、E1蛋白,其中Cap蛋白是病毒粒子形成和存活所必须的元件[5,9]。
近年来,我国多数地区均检测到盖他病毒感染并呈上升趋势,病毒分离地几乎跨越我国全境(从北纬19°至46°18')。宿主范围不断扩大(我国流行宿主新增猪、狐狸、马和牛),对我国的养殖业形成潜在威胁。目前虽尚无人类临床发病的报道,但在健康人和发热病人血清中均检测到盖他病毒中和抗体[10-11],一般认定其为人兽共患病病毒[12]。结合全球流行趋势和我国的流行情况,该病毒近年在我国存在暴发的可能性。……
