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吡虫啉单克隆抗体的制备及其间接竞争化学发光酶联免疫分析方法的建立

2021-11-03柳心梅卢迪莎程勇健肖治理

分析测试学报 2021年10期
关键词:检测方法

谢 波,柳心梅,卢迪莎,程勇健,罗 林,肖治理

(广东省食品质量安全重点实验室 华南农业大学食品学院,广东 广州 510642)

吡虫啉(Imidacloprid,IMI),又名1-(6-氯吡啶-3-吡啶基甲基)-N-硝基亚咪唑烷-2-基胺,是使用最普遍的烟碱类农药之一[1],主要用于防治水稻、蔬菜、棉花等作物上的刺吸式口器害虫,如蚜虫、叶蝉、白粉虱等[2]。吡虫啉通过作用于昆虫的乙酰胆碱受体而使害虫麻痹,最终死亡[3-4]。已有研究表明,吡虫啉可大量在地表水、土壤、湿地等多种环境介质中聚集,也会富聚在食物表面[5-6]。大剂量的吡虫啉会引起动物胸腺、胰腺、骨髓的退行性改变,长期食用含有吡虫啉残留的农产品,还会对人体胃粘膜造成一定的损伤[7-8]。我国对吡虫啉制定的限量标准中水果蔬菜的最大残留限量最低为0.05 mg/kg[9]。因此,对食品中的吡虫啉残留加强检测监控显得十分必要。

吡虫啉的检测方法主要有仪器法和免疫分析方法,仪器法主要包括气相色谱法(GC)[10]、高效液相色谱法(HPLC)等[11-12]。这些方法虽然能准确检测吡虫啉残留,但样品前处理和操作复杂,设备昂贵,且需要配备专业的技术人员,成本较高,不适用于大批量样品的筛选和现场检测。基于抗原抗体特异性反应的免疫分析方法因具有灵敏度高、特异性好、方便快速等优势,成为研究的热点。常用的免疫分析方法有胶体金免疫层析法[13-14]、酶联免疫分析法(ELISA)[15-16]等。与其它免疫分析法相比,胶体金免疫层析法灵敏度较低,通常只能实现半定量检测。ELISA法采用辣根过氧化物酶(HRP)等标记抗原或抗体,通过酶催化底物的显色反应进行定量,但常规ELISA方法采用四甲基联苯胺和过氧化氢作为底物,其灵敏度有限,有时不能满足检测限量低的药物的检测要求。……

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