藏系绵羊Smo基因的克隆测序及其功能的细胞水平验证
2021-11-01郑玉才金素钰
西南民族大学学报(自然科学版) 2021年5期
郑玉才,于 淼,金素钰,黄 林
(西南民族大学畜牧兽医学院,四川 成都 610041)
藏系绵羊(Ovis aries)是中国青藏高原地区的重要家畜之一,基于外貌特征、生产性能可分为三种类型,包括高原型、山谷型和山地型[1].其中,高原型藏系绵羊的比例较高,其毛纤维质量好,是生产羊毛制品的优质原料[2].目前,有关高原型藏系绵羊绒毛生产性能已有一些报道[3],但对其绒毛性状的分子基础研究尚不多.研究藏系绵羊绒毛性状相关基因可为其选育提供科学依据,具有重要意义.
本实验以Hh(Hedgehog)信号通路为切入点,该通路是调控机体发育的一种重要通路[4],与毛囊发育相关.脊椎动物中Hh蛋白含有3种异构体(Dhh、Ihh和Shh),其中Shh为该家族中唯一能在毛囊中表达的成员,是Shh信号通路的重要成员,在毛囊发育中有关键作用[5-6].Smoothened(Smo)基因编码的Smo蛋白是一种G蛋白偶联受体,作为Shh信号通路中的受体之一而发挥重要作用[7].Smo基因的序列较保守,小鼠、人和绵羊Smo基因的编码区长度均在2 kb左右.目前GenBank中绵羊Smo基因仅有预测序列(XM_012131455.2),编码区长度2 342 bp,编码779个氨基酸.本研究设想Smo基因可影响Hh通路中的下游基因表达,影响藏系绵羊毛囊细胞的功能.本研究通过构建高原型藏系绵羊Smo基因的皮肤特异表达载体和干扰载体,通过转染体外培养的人内根鞘细胞,检测该基因对Hh通路下游靶基因(Gli1和Gsk3β)mRNA水平的影响,阐明该基因细胞水平的调控机制.
1 材料与方法
1.1 皮肤样品采集
样品采集于9月份.在四川省都江堰市郊区一个屠宰场,选取……
登录APP查看全文