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白及基因组DNA分离方法效果比较

2021-10-29张子雄蒋影张家春戚燕强孙超

种子科技 2021年17期

张子雄 蒋影 张家春 戚燕强 孙超

摘    要:以白及为试验材料,采用优化的CTAB法和试剂盒法提取白及叶片的基因组DNA。结果表明:优化的CTAB法提取出的DNA检测浓度值为252.8~664.8 ng/μL,试剂盒法的检测浓度值为31.7~52.3 ng/μL。证明优化CTAB法和DNA试剂盒法都能获得基因组DNA的良好完整性和高纯度。

关键词:白及;DNA提取;优化的CTAB;试剂盒法

文章编号:1005-2690(2021)17-0022-02       中国图书分类号:R282.71       文献标志码:B

白及(Bletilla striata (Thunb.)H.G.Reichenbach)是兰科白及属的多年生草本植物[1],主要分布于我国贵州、广西、云南、湖南省等多数地区[2-4]。基因组DNA承载着植物的基本遗传物质和遗传信息,要进行其后续的分子层面的生物学试验,提取一定数量、高质量的DNA样品是必不可少的。根据不同植物种的生物特性和基因组DNA的不同,进行提取方法的优化是进行分子标记试验的第一步也是最为关键的一步[5-6]。由于白及的叶片中富含有多糖、多酚等次生代谢产物,不容易去掉杂质,经反复试验,总结出此试验方法步骤。

1   结果与分析

1.1   DNA琼脂糖凝胶电泳检测分析

使用优化的CTAB法提取白及基因组DNA琼脂糖凝胶电泳结果见图1,DNA电泳条带整齐清楚明显,没有拖带,DNA的条带均高于Marker的最高条带。使用DNA提取试剂盒法提取结果如图2,条带也依然清晰明亮。使用传统CTAB法如图3,会发现有些孔中电泳条带有拖带现象,有些孔中提取的DNA电泳条带很弱甚至无条带。

1.2   基因组DNA浓度和纯度检测分析

使用优化的CTAB法提取白及基因组DNA浓度和纯度检测结果见表1。结果中所含有的RNA、蛋白质、酚类物质的杂质、残留的盐或小分子杂质较少。……

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