郭 茂，陈 琰，李兴元，孔德营

遵义医科大学 基础医学院生理学教研室，贵州 遵义 563000

氰戊菊酯(Fenvalerate，Fen)是一种Ⅱ型拟除虫菊酯类农药，因其具有高效、 低毒、 低残留等特点，而被广泛应用于农业生产和家庭生活中，但其对人类的生殖健康具有明显的危害性．研究表明，氰戊菊酯是一种环境内分泌干扰物[1]，具有明显的雄性生殖毒性，可通过影响睾酮合成相关酶和蛋白的表达而影响雄性体内睾酮的含量，以及影响支持细胞和间质细胞的功能来干扰下丘脑-垂体-性腺轴的调节作用[2-5]，使雄性生精过程受损，导致精子数量减少及活力降低．此外，研究表明，雄性体内的雌激素对雄性生殖功能也具有重要调节作用[6]，氰戊菊酯在干扰睾酮分泌的同时，是否也干扰了雄性体内的雌激素分泌以及其受体的表达从而产生生殖毒性？为了验证我们的猜想，本研究拟通过分析雌激素及其受体ERβ在Fen染毒后的表达情况，探讨Fen等拟除虫菊酯类农药杀虫剂所致雄性生殖毒性的相关机制.

1 材料与方法

1.1 材 料

1.1.1 主要试剂

Fen原药(纯度98.80%)，北京坛墨质检科技有限公司产品； HE染色试剂盒，北京索莱宝科技有限公司； 雌二醇(E2) ELISA试剂盒，上海江莱生物科技有限公司； BCA蛋白浓度测定试剂盒，北京索莱宝科技有限公司； CYP19A1，Caspase 3，Caspase 9抗体，英国Abcam公司； ERβ，Bax，Bcl-2抗体，武汉三鹰生物技术有限公司； RNA逆转试剂盒和SYBR Premix Ex Taq，日本Takara 公司； TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(增强型绿光)，武汉伊莱瑞特生物科技公司.

1.1.2 仪 器

低温高速离心机，美国Thermo公司； 分光光度计(ND2000C型)，美国Thermo公司；……