王从 刘新庆

（1 浙江省中西医结合医院 杭州310003；2 江西省人民医院 南昌330006）

在以往的抗龋制剂研究以及临床应用中，氟化物的抗龋作用已得到广泛认可[1~4]。临床上最常用的氟化物为氟化钠（NaF），但由于其生物活性不高，通常需要较大剂量才能达到临床防龋抑菌的效果。然而，高剂量的氟化物容易导致耐氟菌株的出现以及婴幼儿氟中毒[5]。因此，当务之急是找到安全有效的生物防龋制剂。

本实验主要研究纯天然生物制剂壳聚糖（CTS）的抑菌性。通过对比不同浓度CTS 与NaF 对S 型变形链球菌（S.Mutans）的影响，评估 CTS 对 S.Mutans的抑制作用，为CTS 作为口腔抑菌剂使用提供理论依据。现报道如下：

1 材料和方法

1.1 材料 实验菌株：S.Mutans ATCC25175 菌株由广东省微生物菌种保藏中心提供。主要实验试剂的配制：（1）脑心浸液肉汤（BHI）液体培养基的配制。用电子天平称取38.5 g BHI 粉末，而后溶于1 000 ml 蒸馏水，高压灭菌后备用。（2）CTS 溶液的配置。用乙酸溶液溶解CTS 粉末，用1 mol/L NaOH溶液调节pH 至5.4 并定容至100 ml，121℃高压灭菌15 min 进行二次稀释，得到浓度为0.01%、0.03%、0.05%、0.10%、0.30%、0.50%的 CTS 溶液。（3）NaF 溶液的配置。用5 g 无水NaF 粉剂和50 ml双蒸水配制10% NaF 溶液，二次稀释至0.01%、0.03%、0.05%、0.10%、0.30%、0.50%。S.Mutans 复苏培养：用75%酒精棉球擦拭S.Mutans 冻干菌种管表面，进行消毒，在无菌条件下打开，吸取0.5 ml BHI，并将所有冻干粉末加入裂解液冻干管中，重复移液几次以完全溶解并混合细菌粉末。用无菌移液管吸取溶解后的菌种悬液，接种于BHI 平板内，并在80%N2、20%CO2、10%H2条件下，37℃恒温箱中培养24 h，使之成为菌落。随后进行涂片，革兰染色，油镜下观察。S.Mutans 传代培养：将待复苏细菌鉴定为纯培养后，传33 代培养第一代细菌，通过转接2~3 代恢复冻干细菌的整个生命活力，此时细菌处于性能稳定的对数生长期，各项指标均可充分表达。……