莫钻兰 李 敏 黄炳炽 彭家杰 洪伟彬 胡健声 黄洁莹

广东省东莞市动物疫病预防控制中心，广东东莞523000

急性肝胰腺坏死病（acute hepatopancreatic ne⁃crosis disease，AHPND），因其主要发生于虾苗放养后7～30 d，又名早期死亡综合征（early mortality syn⁃drome，EMS）[1-2]，死亡率可达100%[3]，是近年来出现的一种新型致命性的细菌性疾病，主要危害凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）、斑节对虾（Penaeus monodon）和中国明对虾（Fenneropenaeus chinensis）。该病最早于2010年被发现，近年来，马来西亚、越南、泰国、菲律宾、墨西哥等国家相继有所报道[4-9]，使全球对虾养殖业每年损失近10 亿美元[10]，严重影响了对虾产业的发展。

血清学分型、生化鉴定是检测鉴定细菌的经典方法，郭书林等[11]研究发现，MALDI-TOF-MS 检测效率高于生化鉴定方法，与PCR 结合使用更有利于急性肝胰腺坏死病的诊断和监测。随着检测技术的不断发展，越来越多商品化的实时荧光定量PCR检测试剂盒被研发出来。本研究就本实验室参加的急性肝胰腺坏死能力测试的样品来对比和分析不同商品化荧光定量PCR 试剂盒检测结果的一致性。

1 材料与方法

1.1 材 料

1）样品。此次待检样品和阳性标准物质均由中国水产研究院黄海水产研究所（以下简称黄海所）提供。8 份样品均保存于95%乙醇中，编号为107873、107231、107122、107512、107243、107235、107431、107233。

2）试剂。海洋动物组织基因组DNA 提取试剂盒（批号：S8107）购自天根；引物探针（批号：111516527）由生工生物工程（上海）股份有限公司合成；预混液（批号：AK11116A）购自Takara；3 种商品化的对虾肝胰腺坏死荧光PCR 检测试剂盒分别来自不同生产厂家：A（批号：200417）、B（批号：67054）、C（批号：JC0003202006）。

3）仪器设备。生物安全柜，高速离心机，荧光PCR仪。

1.2 方 法

1）本次能力测试要求的检测方法。……